JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 1:29 dk. • February 26th, 2026
Patojenik bakterilerle enfekte edilmiş ve hücre içi dahil edici vücutlar oluşturan bir bağışıklık hücresi kültürünle başlayın.
Bakteriyel enfeksiyon, bağışıklık hücrelerindeki antijen sunum yolunu bozar.
Kontrol olarak enfekte olmayan bir kültürü ele alalım.
Sonra, model bir protein antijeni ekleyip kuluçka yapın.
Bağışıklık hücreleri, model antijen türevli peptitleri MHC-I moleküllerinde içselleştirir, işler ve sunar.
İnkubasyondan sonra, hücreleri yıkarak işlenmemiş antijenleri çıkarın.
Hücreleri sabitleyin, ardından fiksasyonu nötralize etmek için bir söndürücü madde ekleyin.
Mühendislik ürünü CD8+ T hücrelerini tanıtın ve kuluçka için.
Bu hücreler, MHC-I molekülünde gösterilen antijen parçasını tanır, aktive olur ve MHC-I aracılı antijen sunumu için bir belirteç olarak hizmet eden bir enzim salgılar.
Sonra, enzimle reaksiyona girerek kolorimetrik sinyal üreten bir substrat ekleyin.
Soğurmayı ölç. Enfekte hücre kültüründe enfekte olmayan kültüre kıyasla azalmış emilim, bakteriyel enfeksiyon nedeniyle MHC-I antijen sunumunun verimliliğinin bozulduğunu gösterir.