JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 1:20 dk. • February 26th, 2026
Çoklu kuyulu plakada insan idrar mesane epitel hücrelerinin kültürlerini alın.
Kontrol kültürünü, bakteriyel yüzeyde pili, tüy benzeri yapılara sahip patojenik bir bakteri olan vahşi tip Enterobacter cloacae ile kuluçka edin.
Pili alt birimi, konak hücre reseptörüne bağlanır ve vahşi tip bakterileri konak hücreye sabitler.
FimH içermeyen mutant Enterobacter cloacae ile deneysel kültürü kuluçka altına alın.
FimH olmadan, mutant bakteriler konak hücrelere yapışamaz.
İnkubasyon sonrası, bağlanmamış bakterileri çıkarmak için bir tampon ile yıkayın.
Bir liz tamponu ekleyin ve konak hücreleri bozmak ve yapışkan bakterileri serbest bırakmak için kışkırtma altında kuluçka yapın.
Lizatları seri olarak seyreltirin, besin ortamına yerleştirin ve kuluçka için.
Kontrol kültüründen elde edilen lizat, koloniler oluştururken, deneysel kültürden elde edilen lizatlar bunu sağlamaz; bu da FimH'nin konak hücrelere bakteriyel yapışma için gerekli olduğunu doğrular.