$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Patojenik Aeromonas bakterisinin bulunduğu bir çim içeren besin açısından zengin bir nematod büyüme ortamı plakasıyla başlayın.
Kas spesifik GFP ifade eden L4-aşama C. elegans solucanlarını bakteriyel çime aktarın ve kuluçka yapın.
Solucanlar besinlerle birlikte bakterileri de tüketir. Bu, bakterilerin bağırsağa ulaşmasını ve kolonileşmesini sağlar.
Aeromonas, özel bir salgı sistemi kullanarak solucanın bağırsak hücrelerine virülans faktörleri iletir.
Bu virülans faktörleri vücut duvarına yayılır ve burada kası bozarak yapısal hasar ve nekroza neden olur.
Solucanları sürekli patojenlere maruz kalmasını sağlamak için her gün bakteriyel çimli yeni bir tabakaya taşıyın.
Solucanları anestezi etmek için anestezi edici bir maddeyle takviye edilmiş bir agaroz jelinin üzerine yerleştirin, ardından bir örtü kuşağı yerleştirin.
GFP filtresi kullanarak, floresans görüntülerini düzenli aralıklarla yakalayın.
GFP sinyalinin ilerleyici kaybı, C. elegans'ta kas bozulmasını gösterir; bu , konak-patojen etkileşimi sırasında Aeromonas kaynaklı kas nekrozunu temsil eder.
Aeromonas suşları kültürlendikten ve metin protokolüne göre emilimini ayarladıktan sonra, bakteriyel suyu NGM plakalarına yerleştirip yayın.
Bundan sonra, her NGM plakasına 50 L4 solucanı aktarın. Her 24 saatte bir solucanları taze NGM plakalarına aktarın. Rastgele 10 solucan seçip onları M9 ortamında %2 agaroz jeline bir slayt üzerinde aktar.
Son olarak, jelin üzerine bir coverslip yerleştirin ve yeşil floresan protein filtresiyle kamera ile donatılmış floresan mikroskopta kas görüntüleri alın.