Bakteriyel ekzopolisakkarit bozunmasını değerlendirmek için ince katmanlı kromatografi yapılması
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:23 dk. • March 31st, 2026
Bozunmuş ve bozulmamış ekzopolisakkaridler (EPS) içeren fermente süpernatantlarla başlayın.
Bu EPS, her süpernatanttaki farklı dışkı bakteri popülasyonlarının EPS üzerinde farklı şekilde etki ettiği fermantasyon sırasında elde edilir.
Üst yüzeyleri, polar sabit bir faz ile önceden kaplanmış ince katmanlı kromatografi plakasının tabanına yakın konumda tespit edin.
Plakayı hava ile kurutun, ardından sabit faza göre daha düşük polariteye sahip hareketli bir faz içeren bir odaya yerleştirin.
Mobil faz yükseldikçe, EPS polaritelerine ve büyüklüklerine göre göç eder.
Büyük, bozulmamış EPS, durağan fazla güçlü şekilde etkileşime girer ve köken yakınında kalır.
Daha küçük bozunmuş parçalar zayıf bağlanır ve hareketli fazla birlikte yukarıya doğru hareket eder.
Plakayı çıkarın ve hava ile kurutulun.
Plakayı, EPS ile reaksiyona giren karbonhidrat boyama reaktifine daldırın.
Plakayı hava ile kurut, sonra EPS'yi kurutmak ve renkli bantlar oluşturmak için ısıtın.
Köken yakınındaki tek bir bant, bozulmamış EPS'yi doğrularken, birden fazla bant bakteriler tarafından EPS bozulmasını doğrular.
Her önceden kaplanmış silika jel 60 TLC alüminyum plakaya 0,2 mikrolitre fermente edilmiş süpernatantlar yükleyin ve
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin