JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:48 dk. • February 26th, 2026
Vibrio cholerae'nin antibiyotik dirençli suşuyla enfekte olmuş yetişkin bir zebra balığıyla başlayın. Bu patojenik bakteri, β-galaktosidaz enzimini ifade eder ve bağırsak yolunu kolonileştirir.
Balığı toplayıp aşırı doz anestezi içeren bir çözeltiye aktararak ötenazi yapın.
Balığın ventral tarafını yukarı koyun ve iğnelerle sabitleyin.
Karın bölgesini dezenfekte edin, uzunlamasına bir cilt kesisi ve başa doğru iki yan kesi yapın, ardından deriyi iğneleyerek bağırsak yolunu açığa çıkarın.
Traktı, cam boncuklarla dolu soğuk tampon içeren bir homojenleştirme tüpüne aktarın.
Cam boncukların dokuyu bozup bakterileri serbest bırakmasına izin vererek tahrik ile inkübe yapın.
Homojenatı seri olarak seyreltirin, ortama kaplama yapın ve kuluçka yapın. Ortam, kromojenik β-galaktosidaz substratı ve kirleticileri ortadan kaldırmak için bir antibiyotik içerir.
Bakteriler, kromojenik substratı hidrolize eden β-galaktosidaz enzimini ifade eder ve mavi pigmentli kolonilerin oluşumuna yol açar.
Bağırsak bakteri yükünü tahmin etmek için kolonileri sayın.
Deney istenen son noktaya ulaştığında, tanı amaçlı enfeksiyon suyundan 15 mililitre örnek alın. Sonra balıkları topla ve enfekte suyu uygun şekilde bertaraf
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin