JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:42 dk. • February 26th, 2026
Kronik bağırsak enfeksiyonunu modelleyen antibiyotiklere dirençli bakteriyel suşla enfekte edilmiş ötenazi edilmiş bir fareyle başlayın.
Karın boşluğunu açığa çıkararak çekum ve dalağa ulaşın.
Bağırsak ve sistemik bakteriyelleşme bölgelerini temsil eden çek ve dalak dokularını toplayın.
Her dokuyu bir tampon ve çelik boncuk içeren ayrı bir tüpte yerleştirin.
Tüpleri hızla karıştırarak dokuyu homojenleştirin; böylece çelik boncuklar dokuya çarpmasına, parçalanmasına ve bakterilerin süspansiyona salınmasına neden olur.
Bakteri konsantrasyonunu azaltmak için tampon içindeki homojenatların seri seyreltilmesi uygulanır.
Her seyreltmeden alınan plaka aliquotları besin agara ve antibiyotikle takviye edilip antibiyotik dirençli bakterileri seçici olarak geri kazandırılır.
Plakaları kuluçkaya geçirerek canlı bakterilerin kolonilere dönüşmesini sağlar.
Kolonileri sayarak bir gram doku başına canlı bakteri sayısını tahmin edin ve sekum ile dalaktaki bakteri yüklerini karşılaştırın.
Öncelikle, 2 mililitrelik güvenli kilitli yuvarlak tabanlı mikrotüpler yerleştirin, her tüpte 1 mililitre steril PBS ve otoklavlanmış paslanmaz çelik boncuk ekleyin. Tüpleri doku toplamadan önce önceden tartın.
Fareleri öten
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin