Vajinal Grup B Streptococcus Enfeksiyonunun Fare Modeli Oluşturulması

Grup B Streptococcus veya GBS kültürünü, fırsatçı bakteriyel bir patojen olarak alın.

Kültürü taze ortamda seyreldin ve aktif olarak bölünen bakteriler elde etmek için kuluçka yapın.

Kültürü konik bir tüpe aktarın.

Santrifüj yaparak bakterileri pellet et, sonra süpernatantı at.

Bakterileri tampon ile yıkayın.

Tekrar santrifüj yapın, süpernatantı çıkarın ve bakteriyi tampon içinde yeniden süzültün.

Sonra, enfeksiyona daha yatkın olan, astarlı vajinal epitelli hormonlu dişi bir fare kullanın.

Fareyi tutun. İnce bir pipet ucu kullanarak GBS süspansiyonunu vajinal lümene dağıtın.

Fareyi bırakın, kuyruğunu kaldırın ve ön patilerin sağlam bir yüzeyde yürümesine izin verin.

Bu, vajinal lümende inokulum tutulmasını teşvik eder ve GBS tutumunu mümkün kılar.

Vajinal açıklığı inokulum geri akışı için kontrol edin.

Yapışan bakteriler vajinal epitel yüzeyini kolonileştirir ve enfeksiyon oluşturur.

Vajinal enfeksiyonlu fare modeli daha fazla çalışmaya hazırdır.

Enjeksiyon günü, Todd Hewitt çorbasında (THB) ilgi gören GBS suşunun beş mililitrelik sıvı kültürünü 37 derece Celsius'ta yetiştirin.

Ertesi sabah, GBS'yi 1 ila 10 hacimde taze THB'de altkültürlenerek 37 derece Celsius'ta iki ila üç saatlik kuluçka içi