JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:41 dk. • February 26th, 2026
Patojenik bakteri askısını alın.
Süspansiyonu, kemik iliği kaynaklı makrofaj veya BMDM hücrelerinin yapışmış kültürüne ekleyin ve kuluçka yapın.
Bakteriler, yüzey proteinlerini kullanarak konak hücre reseptörlerine bağlanır ve bu da yapışmayı kolaylaştırır.
Yapışmamış bakterileri temizlemek için bir tampon ile durulayın.
Taze ortam ekleyin ve kuluçka yapın.
Yapışan bakteriler daha sonra konak hücre tarafından içselleştirilir.
İçselleştirilmeyen bakterileri öldürmek için bir antibiyotik ekleyin.
Medya maddesini atın ve tampon ile yıkayın.
Konak hücreyi lizize etmek için soğuk su ekleyin; böylece hücre içeriği, çekirdeği ve içselleştirilmiş bakterileri serbest bırakın.
Hücre lizatını ve santrifüjünü toplayarak hücresel kalıntıları çökeltin.
Bakteriyi içeren süpernatantı toplayın. Bir filtreleme cihazından geçirerek sağlam bakterileri yakalayın.
Filtre kağıdını katlayın ve bir tüpe yerleştirin.
Hücresel bütünlüğü korumak için sıvı azotta ani dondurma yapın.
Daha fazla kullanım için soğuk koşullarda saklayın.
Yıkanmış bakteri süspansiyonu 0,5 mililitre kullanarak, her makrofaj plakasını enfekte edin. Birden fazla plaka kullanıyorsanız, enfeksiyonları 15 dakika arayla aralıkla bırakın, böylece enfeks
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin