JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:40 dk. • March 31st, 2026
Sırt yatay kalması için karnının altına Petri kabı koyarak anestezi edilmiş bir fareyle başlayın.
Farenin sırtında, Gram-negatif bakteriyel bir patojen olan Acinetobacter baumannii ile enfekte edilmiş bir yanık yarası vardır.
Bakteriler, biyolüminesans operonu taşımak üzere genetik olarak tasarlanmıştır.
Fareyi optimal sıcaklıkta tutulan bir biyolüminesans görüntüleme odasına yerleştirin ve görüntülemeye başlayın.
Enfeksiyon noktasında, biolüminesans operonunun luxA ve luxB genleri lusiferaz enzimini kodlar. luxCDE genleri, lusiferaz substratını sentezleyen enzimleri kodlar.
Lusiferaz, substrat oksidasyonunu katalize eder ve görünür ışık üreterek bakteriyi parlak hale getirir.
Biyolüminesans sinyali, yara bölgesinde metabolik olarak aktif bakterilerin varlığını gösterir.
Görüntüleme yazılımı kullanılarak, biyolüminesans sinyal yoğunluğunu nicelikten ölçerek canlı bakteri yükünü tahmin edin.
Aşıdan hemen sonra, canlı görüntüleme yazılımını başlatarak biyolüminesans görüntüleme yapın. Kontrol panelinde, başlat tuşuna tıklayın. Sonra sıcaklık kutusunun rengi yeşile dönene kadar beklen, bu da numune odasındaki aşamanın sıcaklığının 37 derece Celsius'a ulaştığını gösterir.
Anestezi edilmiş farey
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin