JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:52 dk. • March 31st, 2026
Sırtı açık, bir Petri kabı kapağına yerleştirilmiş anestezi edilmiş bir fareyle başlayın.
Farenin yanık yarası biyolüminesans, ilaca dirençli bakterilerle enfekte olmuştur.
Farenin gözlerini mavi ışığa aşırı maruz kalmamak için alüminyum folyo ile kapatın.
Fareyi sabit mesafede mavi bir LED cihazın altına yerleştirin.
Yarayı sabit bir yoğunlukta ışınlayın. Daha yüksek dozlar vermek için maruz kalma süresini artırın.
Işık, yara dokusunu deşip kolonileştirici bakterilere ulaşır.
Bu bakteriler içinde, ışığa duyarlı moleküller mavi ışığı emer ve fotoaktif hale gelir, böylece reaktif oksijen türleri (ROS) üretirler.
ROS, biyolüminesans proteinler dahil olmak üzere bakteriyel bileşenlere zarar verir ve çevredeki dokuya minimum zarar veren bakteriyel hücre ölümüne yol açar.
Her maruziyetten sonra, yara çevresindeki bakteriyelliği izlemek için biyolüminesans görüntüleme yapılabilir.
Doz arttıkça, sinyal buna göre azalır.
Bu düşüş, mavi ışık kaynaklı oksidatif stresin antibakteriyel etkisini gösterir.
Fareler anestezi edildikten sonra, metin protokolüne göre hayvanları rastgele antimikrobiyal mavi ışık veya aBL ile tedavi edilmiş bir grup ile tedavi edilmemiş kontrol grubuna ayırın. aBL ile işlenmiş grup için, farelerin gözlerini kaplamak için alüminyum folyo kullanarak ışığa aşırı maruz kalmamayı önleyin. Fare yanıklarını doğrudan LED'in altına yerleştirin, fare karnının altına 35 milimetrelik bir petri kabı kapağı yerleştirin, böylece sırt yatay konumda kalsın.
Sonra, güç enerjisi ölçerini kare bir petri kabındaki fareyle değiştirin. Sonra farenin yüksekliğini, LED diyafram ile fare yanığı yüzeyi arasındaki mesafenin LED diyafram ile güç enerjisi ölçerinin ışık sensörü arasındaki mesafeye eşit olduğu bir konuma geri ayarlayın. Enfekte yanıkları 100 miliwatt/santimetre kare ışıklandırma oranında ışınlandırın.
ABL'yi 72 joule anakotları ile verin ve toplam doz 360 joule per santimetre kare ulaşın. Her ışık dozundan sonra, bu videoda daha önce gösterildiği gibi fare yanıklarının biyolüminesans görüntülemesi yapılabilir. Tedavi edilmemiş kontrol grubu için, fare yanıklarının biyolüminesans görüntülemesi yapılarak aBL ile tedavi edilen grupta kullanılan aynı zaman aralıkları kullanılır.