Ağızdan Patogenezi İnceleme İçin Bakteriyel-Mantar Çapraz Biyofilmlerin Oluşturulması

Oral patojenik bir bakteri olan Streptococcus mutans ve fırsatçı mantar patojen Candida albicans kültürleriyle başlayın.

İzole kolonileri besin açısından zengin bir ortama aktarın ve aktif büyümeyi sağlamak için gece boyunca kuluçka yapın.

Hücreleri pelletlemek için santrifüj. Süpernatant çıkarılır ve hücreleri steril tuzlu sunda belirli bir konsantrasyona yeniden süstürüler.

Ağız ortamını taklit etmek için insan tükürük solüsyonuyla kaplanmış çok kuyu bir plaka alın.

C. albicans ekleyin ve tükürük tabakasına tutunmak için kuluçka yapın. Yapışmayan hücreleri temizlemek için steril salinle yıkayın.

Isıya inaktive edilmiş serum ekleyin ve hiphal gelişimini teşvik etmek için kuluçka yapın. Fazla serumu yıkayın.

S. mutans'ı ekleyin, ardından sakaroz açısından zengin ortam ve kuluçka yapın. S. mutans, C. albicans mannans'a bağlanan glukoziltransferaz salgılar.

Bu enzim, mantar yüzeyinde sukrozu glukanlara katalize eder, bakterileri hiplere sabitler ve çoğalma ile matriks oluşumunu teşvik eder.

Bu yöntem, ağızdan patogenezde mikrobiyal sinerjisini modelleyen çapraz krallık biyofilmleri üretir.

S. mutans ve C. albicans'ı kan agar plakalarında 37 derece Celsius sıcaklıkta, aerobik koşullarda yetişt