JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:51 dk. • February 26th, 2026
Bir örtü üzerinde yapışkan kanserli epitel hücreleri içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın.
Shigella flexneri ekleyin, patojenik bir bakteri.
Plakayı santrifüjle ederek bakteriyellerle temasını teşvik edin, ardından kuluçka yapın.
Özel bir salgı sistemi kullanarak, Shigella epitel hücrelerine virülans proteinleri enjekte eder.
Bu virülans proteinler, epitelyal sinyal sistemini modüle ederek bakteri alımını kolaylaştırır.
Hücrelerin içinde bakteriler, hücresel çeviriyi bozan ve çevrilmemiş mRNA'lar biriktiren virülans proteinleri salgılamaya devam eder.
RNA bağlayıcı ve sinyal proteinleri, çevrilmemiş mRNA'larla birleşerek stres granülleri olarak bilinen zarsız sitoplazmik granüller oluşturur.
Malzemeyi atın ve yapışmamış bakterileri temizlemek için yıkayın.
Sonra, yüzeye yapışan bakterileri yok etmek için gentamisin ile takviye edilmiş önceden ısıtılmış kültür ortamı ekleyin.
Hücresel yapıları ve stres granüllerini korumak için bir fiksasyon ekleyin.
Sabitleyiciyi atıp kalan fiksantörü çıkarmak için hafifçe çalkalayarak yıkayın.
Hücreler, Shigella kaynaklı stres granüllerini görselleştirmek için immünoflüoresans boyamaya hazırdır.
Yıkamayı her kuyu başına 500 mikrolitre enfeksiyon ortamı il
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin