JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiyoloji
0 görüntüleme • 1:45 dk • February 26th, 2026
Büyük bağırsaktaki bir bölge olan sekumdan doku kriyoseksiyonları alın. Bir bölüm, yalnızca Clostridioides difficile ile enfekte edilmiş bir fare tarafından alınmıştır. Diğer bölüm ise C. difficile ve Enterococcus faecalis ile birlikte enfekte edilmiş bir fareden alınmıştır.
Eş-enfekte dokuda, E. faecalis konak arginini metabolize eder ve ornitin salgılar. C. difficile bu ornitini emerek büyüme ile ilişkili toksin üretimini ve doku hasarını teşvik eder.
Bu örnekleri MALDI görüntüleme ile analiz etmek için, tekdüz bir matris çözeltisi katmanı uygulanır.
Slaytları bir MALDI kütle spektrometresine yükleyin; burada bir lazer dokuyu tarar ve matris boyunca amino asitleri iyonlaştırır.
Slaytları bir MALDI kütle spektrometresine yükleyin; burada bir lazer dokuyu tarar ve matris boyunca amino asitleri iyonlaştırır.
Ortaya çıkan iyonlar kütle-yük oranına göre ayrılır ve cihaz tarafından tespit edilerek amino asit dağılımının mekansal haritaları oluşturulur.
Birlikte enfekte olan doku, monoenfekte numuneye göre daha düşük arginin ve daha yüksek ornitin seviyeleri gösterir; bu da mikrobiyal işbirliği odaklı C. difficile patogenezini destekler.
Daha önce gösterildiği gibi MALDI matris uygulaması ve MALDI görüntüleme kütle spektrometrisi uygulanır.
Birden fazla biyolojik kopyadan alınan iyon görüntülerini analiz edin ve SCiLS istatistiksel yazılımını kullanarak yoğunluk kutusu grafik karşılaştırmalarıyla sonuçları önemlilik açısından karşılaştırın.