Morfolojik Analiz için Bakteriyel Biyofilm Kolonilerinin Hazırlanması

Besin bir agar plakasında yetiştirilen bakteriyel biyofilm kolonileriyle başlayın.

Bu biyofilmler, kapsüllenmiş bakterileri konak bağışıklık tepkilerinden koruyan hidrofobik bir hücre dışı matriksten oluşur.

Bir sabitleyici ekleyin ve plakayı nazikçe döndürerek biyofilm yüzmeye başlayın.

Plakayı sızdırmaz hale getirin ve biyofilm yapısını korumak için nazik sallama ile kuluçka yapın.

Fiksantörü çıkarın, tampon ekleyin ve biyofilm yapısını stabilize etmek için kuluçka yapın.

Bir Pasteur pipeti kullanarak, koloniyi agardan nazikçe ayırın.

Bakteri kolonilerini kurutmak için artan etanol konsantrasyonları ekleyin.

Yüzen bir koloniyi etanolle ıslatılmış bir filtre kağıdına aktarın ve kapalı bir odada hava kurutun.

Kurumuş kolonileri, elektron ışını kaynaklı şarj oluşunu önlemek için karbon bantla kaplı bir kılıf ve köprüye karbon bantla monte edin.

Sonrasında, görüntü kontrastını artırmak için biyofilmi iletken bir metal tabaka ile kaplayın.

Biyofilm artık elektron mikroskopi ile morfolojik analiz için hazırdır.

Örnek fiksasyonuna başlamak için, önce istenen sayıda biyofilm koloni için yeterli taze fiksatif çözelti hazırlayın. Her petri kabına dikkatlice 5 mililitre fiksatif ekleyin ve doğrudan ko