JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:34 dk. • February 26th, 2026
Besin açısından zengin ortamlarda yetiştirilen biyofilm oluşturan bakteri kültürünü ele alalım.
Kültürü taze ortamda seyreldin ve istenen konsantrasyona ulaşana kadar bakteri büyümesini teşvik etmek için çalkalama ile kuluçka yapın.
Sonra, kültürü kistik fibrozdan kaynaklanan hasta kaynaklı balgam filtratlarıyla zenginleştirilmiş taze ortama ekleyin.
Bu filtratlar, bakteriyi biyofilm oluşumu için hazırlayan konaktan türemiş faktörler içerir.
Hazırlanan süspansiyonu odalı bir örtü camının kuyularına dağıtın ve bakterilerin cam yüzeyine tutunması için statik olarak kuluçka yapın.
İnkubasyondan sonra, ortamı çıkarın ve yapışmayan bakterileri yok etmek için kuyrukları nazikçe taze ortamla durulayın.
Kuyular içine balgam filtrasyonu içeren taze ortam ekleyin ve tekrar odayı statik olarak inkubka yapın.
İnkubasyon sırasında, ortamdaki konak kaynaklı faktörler, hücre dışı matriks üretimini tetikleyen ve yapılandırılmış biyofilm gelişimini teşvik eden bakteriyel sinyal yollarını aktive eder.
Biyofilm artık daha fazla analiz için hazırdır.
Önceden hazırlanmış kültürden 40 mikrolitre taze Luria çorbasına (LB medyası) yerleştirilir ve bakteriyi büyüterek 600 nanometrede 0,55 optik yoğunlukta bir kültü
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin