Clostridium difficile enfeksiyonunun fare modeli oluşturulması

Bağırsak mikrobiyotasını azaltmak için antibiyotiklerle önceden tedavi edilmiş bir fareyle başlayın.

Fareyi nazikçe dik pozisyonda tutarak yemek borusunu uzatın.

Sonra, anaerobik bakteriyel bir patojenden türetilen sporlardan oluşan bir inokulum içeren bir şırıngaya bağlı ağız iğnesi alın.

Gavaj iğnesini ağzın yanından geçirin ve yavaşça yemek borusuna doğru ilerletin.

İğne orta özofagusa ulaştığında, inokulumu yavaşça verin ve iğneyi nazikçe çekin.

Verilen sporlar mideden ince bağırsağa geçer ve safra tuzları C. difficile vejetatif bakterilere çimlenmeyi tetikler.

Bu bakteriler, rakip mikrobiyotanın azalması, epitel yüzeylerine yapışma, çoğalma ve koloni oluşumunu mümkün kılan anaerobik kolona göç eder.

Kolonize bakteriler, epitel bağlantılarını bozan ve bağırsak bariyerini zedeleyen toksinler salgılar. Bu bariyer bozulması, bakterilerin daha derin dokulara geçişini teşvik eder ve Clostridium difficile infeksiyonunu oluşturur.

Laminar akış başlıkta, bir konu faresi alın ve hayvanın boyun ve sırtındaki gevşek derisiyle nazikçe tutarak başını hareketsiz hale getirin.

İşaret parmağını kullanarak hayvanın ses çıkarmamasını veya rahatsızlık belirtisi göstermemesini sağlayarak, hayvanın başını daha da hareketsiz hale getirin ve yemek borusunu uzatın. Fareyi dik ve dikey pozisyonda tutun ve gavage iğnesini nazikçe ağzın yanına geçirin. Gavaj iğnesini ağız tavanında yönlendirin ve yavaşça yemek borusuna doğru ilerletin.

İğne yemek borusunun yaklaşık yarısına kadar geldiğinde, 25 mikrolitre spor aşısı enjekte edin ve ardından iğneyi nazikçe çekin. Hayvanı kafesine geri götürün ve trakeal verilmesini gösterebilecek öksürük veya solunum sıkıntısı belirtileri için gözlemleyin.