JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:48 dk. • March 31st, 2026
Kırmızı florofor etiketli M ile başlayın. Tüberküloz antijenleri polimer kaplı bir örtü üzerinde immobilize edilmiştir.
Spesifik olmayan bağlama sitelerini engellemek için bir engelleme tamponu ekleyin. Fazla engelleyiciyi çıkarmak için yıkayın.
İlgi duyulan hücre yüzeyi reseptörünü içeren insan makrofajlarından alınan toplam protein eklenin. Kuluçka için.
Makrofaj reseptörleri immobilize edilmiş bakteriyel antijenlere bağlanır.
Reseptör-antijen komplekslerini stabilize etmek için çapraz bağlayıcı ekleyin, ardından reaksiyona girmeyen çapraz bağlayıcıları nötralize etmek için bir söndürücü ekleyin.
Kompleksleri güçlendirmek için yıkayıp ikinci bir çapraz bağlayıcı ekleyin.
Tekrar yıka. Sonra, örtü parçasını çıkarın ve birincil antikor çözeltisi üzerine ters çevirin.
Antikorlar, ilgi duyulan makrofaj reseptörüne bağlanır.
Kaplama kaçıtı, birincil antikorlara bağlanan yeşil florofor konjuge ikincil antikor çözeltisi üzerine yıkayıp ters çevirin.
Kapak slipini yıkayıp monte edin.
Örneği floresan mikroskobu altında görselleştirin. Aynı lokalize kırmızı ve yeşil sinyaller, makrofaj reseptörü ile bakteriyel antijen arasındaki etkileşimi doğrular.
Yuvarlak burunlu cerrahi cımbız kullanarak, 12 milim
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin