JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:43 dk. • March 31st, 2026
Doğuştan gelen bağışıklığın önemli aracı olan interferon adaptör proteininin ifadesinin azaldığı ve hücrelerin Brucella enfeksiyonuna daha yatkın hale getirdiği epitel hücreleriyle başlayın.
Ortamı, istenen konsantrasyonda fakultatif bir hücre içi patojen olan yeşil floresan protein içeren enfeksiyon ortamı ile değiştirin.
Plakayı santrifüjle ederek bakteri ile konak hücreler arasında teması teşvik edin, ardından bakteriyellerin içselleştirilmesini sağlamak için kuluçka yapın.
Hücreleri serum içeren ortamla yıkayın ve ekstrahücre bakterileri yok etmek için antibiyotikle tedavi edin.
Brucella'nın hücre içi olarak çoğalmasını sağlamak için daha fazla kuluçka yapın.
Hücreleri tampon ile yıkayın ve paraformaldehit ile sabitleyerek hücre içi yapıları koruyun.
Fazla fiksanti durulayın. Sonra, hücreleri geçirimlileştirmek için deterjan takviyeli tampon ekleyin.
Kalan deterjanı yıkayın, ardından çekirdekleri boyamak için DAPI ekleyin ve son yıkamayı yapın.
Otomatik bir mikroskop kullanarak, konak epitel hücrelerindeki Brucella enfeksiyonunun yüksek verimli görüntülerini alın.
Otomatik bir plaka yıkama makinesi kullanarak, transfeksiyon ortamını 50 mikrolitre enfeksiyon ortamı ile değiştirin. Kaputu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin