Uyarılı Raman Saçılma Mikroskobu Kullanılarak Bakteriyel Antibiyotik Duyarlılığının Tespiti
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:46 dk. • March 31st, 2026
Öncelikle, hassas bakterileri ortadan kaldıran artan bir antibiyotik konsantrasyonuyla önceden işlenmiş bakteriyel örneklerle başlayın.
Aynı antibiyotik konsantrasyonu içeren bir büyüme ortamı ile ilgili tüplere ekleyin.
Tüpleri sallanma koşullarında kuluçka yapın.
Döteryum oksit bakteri hücrelerine girer ve burada döteryum, yeni sentezlenen biyomoleküllere dahil edilerek karbon–döteryum bağları oluşturur.
Bakterileri döndürün, süpernatantı atın ve yıkayın.
Bakteriyel yapıyı korumak için bir fiksant ekleyin.
Su ekleyin, santrifüj yapın ve üst maddeyi çıkarın.
Bakteriyi yeniden askıya alın ve süspansiyonu poli-L-lizin kaplı bir örtü camına aktarın, ardından kapatın.
Örneği önceden kalibre edilmiş uyarılmış Raman saçılma veya SRS mikroskobunun aşamasına yerleştirin. Su ekleyin ve hedefi düşürün.
Karbon–döteryum titreşim frekansını değerlendirmek için birden fazla alanın görüntülerini alın.
Daha yüksek antibiyotik konsantrasyonlarında karbon–döteryum sinyali azalır ve bu da bakteriyellerin canlılığının azaldığını gösterir.
Bu, SRS sinyal yoğunluğunu bakteriyel canlılıkla ilişkilendirerek antibiyotik hassasiyetinin hızlı değerlendirilmesini sağlar.
1 saatlik kuluçkadan sonra, aynı antibiyotik kons
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin