JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:36 dk. • March 31st, 2026
Enfekte bir bitkiden izole edilmiş patojenik bir bakterinin süspansiyonunu alın.
Bakteriyel genom, virülans-düzenleyici genin promotorunun aynı zamanda aşağı akış, promotorsuz floresan protein geninin ekspresyonunu da yönlendirdiği transkripsiyonel bir füzyon içerir.
Bitki enfeksiyonu sırasında, promotor aktivasyonu düzenleyici ve floresan proteinlerin üretimini tetikler.
Düzenleyici protein virülans genlerini aktive ederken, floresans ise ölçülebilir bir virülans aktivasyonunu gösterir.
Hücreleri santrifüj edin, üst yüzeyi atın ve ardından tekrar süspansiyon ile konsantre bir süspansiyon elde edin.
Bir örtü üzerine bir damla koyup hücreleri yaymak ve hareketsiz hale getirmek için agaroz pediyle örtün.
Tüm bakteri hücrelerini tanımlamak için parlak alan görüntüsü alın, ardından tek hücreli floresansı tespit etmek için floresan görüntüsü alın.
Her ikisini birleştirerek floresans yoğunluk farklarını görselleştirin; bu da yüksek, düşük veya hiç virülans gen ekspresyonuna sahip alt popülasyonları ortaya çıkarır.
Bu fenotipik varyasyon, bitki kolonizasyonu sırasında bakterilerin hayatta kalmasını artıran adaptif bir stratejiyi yansıtır.
Tek hücreli analiz için, damıtılmış suda %1,5 agaroz çözelt
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin