JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 5:12 dk. • March 31st, 2026
Floemanın bakteriyel bir patojenle enfekte olduğu küçük soğutma yaprak dokusu parçalarıyla başlayın.
Parçaları, DNA bozucu nükleazların etkinliğini engellemek için sıvı azotlu bir harca yerleştirin.
Hücreleri mekanik olarak bozmak ve hücre içi bileşenleri serbest bırakmak için öğütün.
Tozu aktarmak için soğutulan bir spatula kullanın, lizis tamponu ekleyin ve süspansiyonu vortex edin.
Bitki çekirdeklerini ve bakteri hücrelerini lizlemek için kuluçka yapın, DNA ve RNA salınırken proteinleri denatüre eder.
RNase ekleyin ve RNA'yı bozgunlaştırmak için kuluçka yapın.
Proteinleri agregasyona protein çökeltme tamponu ekleyin, ardından onları ayırmak için santrifüj yapın.
Bitki ve bakteri DNA'sını içeren üst üste aktarılan DNA'yı izopropanol'e aktararak DNA'yı iplik benzeri iplikler halinde çökelttirin.
DNA toplamak ve süpernatantı atmak için santrifüj yapın.
Etanol ile yıkayıp sonra santrifüj yapın ve üst maddeyi atın.
DNA'yı hava ile kurut, ardından bir rehidrasyon tamponu ekleyip inkübe ile çözünür.
DNA örnekleri artık PCR tabanlı patojen tespitine hazırdır.
Narenciye ağacından taze bir yaprak kesmek için temiz makasla temiz bir plastik sandviç poşetine koyun. Sonra, az miktarda sıvı azot ekleyere
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin