JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiyoloji
0 görüntüleme • 1:50 dk • July 1st, 2026
Begin with a multi-well plate containing a transwell membrane insert.
The insert contains a confluent bronchial epithelial cell layer on the upper side of the membrane.
The insert's lower side holds macrophage-like cells in medium, mimicking the human airway epithelial barrier.
Add pathogenic bacteria suspended in a buffer over the epithelial layer.
Incubate to allow bacterial attachment to the epithelial cells and their colonization.
Then, remove the buffer from the insert while retaining the medium in the well to create an air-liquid interface.
The bacteria secrete virulence factors that interact with epithelial tight junctions and disrupt them.
This increases permeability across the epithelial layer and triggers the release of pro-inflammatory cytokines from the epithelial cells.
These cytokines facilitate the movement of macrophage-like cells toward the epithelial layer, where they recognize and engulf the bacteria.
This establishes an epithelial-macrophage co-culture model at the air-liquid interface, representing pathogen exposure in the respiratory tract.
Add 100 microliters of bacterial suspension to the apical side of the permeable support and incubate the plate at 37 degrees Celsius and 5% carbon dioxide for one hour to allow bacteria to attach to the cells. Then, carefully remove apical liquid with a pipette to restore ALI conditions.
Bu makale, konak-patojen etkileşimlerini, özellikle de Pseudomonas aeruginosa enfeksiyonunu incelemek amacıyla hava-sıvı arayüzünde (ALI) bronşiyal epitel hücreleri ve makrofaj benzeri hücrelerin 3B ko-kültür modelini sunmaktadır. Model, insan hava yolu epitel bariyerini taklit etmekte; epitel bütünlüğünün, immün hücre aktivasyonunun ve patojen temizleme mekanizmalarının gözlemlenmesi yoluyla anti-enfektif stratejilerin preklinik değerlendirmesine olanak sağlamaktadır.
Hava-sıvı arayüzünde 3B ko-kültür modelinin oluşturulması, konakçı-patojen etkileşimlerinin fizyolojik olarak ilgili bir solunum bağlamında öngörülebilir şekilde değerlendirilmesine olanak tanır. Bu sistem, epitel bariyer bozulmasını ve immün hücre yanıtlarını modelleyerek anti-infektif keşifler için mekanistik risk azaltma süreçlerini destekler. Bu yaklaşım, preklinik anti-infektif aday değerlendirmesi ve portföy elemeleri için translasyonel güveni artırır.
Bu ko-kültür modeli, erken dönem mekanistik çalışmalar ile preklinik aday değerlendirmesi arasında köprü kurarak, anti-enfektif Ar-Ge'nin keşiften preklinik aşamaya uzanan sürekliliğine entegre olur.
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
Son güncelleme: 22 Ağustos 2026