Analysis of Macrophage Receptor Interactions with Pathogenic Bacteria Using Flow Cytometry

JoVE Encyclopedia of Experiments

Mikrobiyoloji

0 görüntüleme • 2:26 dk • July 1st, 2026

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Begin with a tube of macrophage protein extract containing host immune receptors.

Add inactivated pathogenic bacteria to provide surface antigens specific to pathogenic strains.

Incubate with rotation to enable immune receptors to bind bacterial antigens, forming receptor–antigen complexes.

Add a crosslinking agent and incubate with shaking to stabilize receptor–antigen complexes.

Introduce a quenching agent to stop the crosslinking reaction.

Add buffer and centrifuge to pellet the complexes.

Remove excess reagents, then resuspend the pellet in a second crosslinking agent to further stabilize the complexes.

Centrifuge and wash the pellet with buffer.

Add fluorescently labeled antibodies and vortex.

Incubate under cold, dark conditions to allow antibodies to bind receptor–antigen complexes.

Resuspend the cells in buffer containing serum.

Finally, analyze receptor–antigen complexes using flow cytometry.

As complexes pass through the laser, they emit fluorescence signals that correlate with receptor-antigen binding, highlighting host-pathogen recognition.

Incubate one times 10 to the power of six whole inactivated Mycobacterium tuberculosis cells with 50 microliters of protein extract from one times ten to the power of six macrophages overnight at 4 degrees Celsius in a rotating microtube holder.

The next day, to stain the protein bacteria complex, add the anti-human SLAMF1 antibody to the microtube, vortex the mixture, and incubate overnight for 30 minutes at 4 degrees Celsius in the dark. After washing the protein bacteria complexes with FACS, resuspend them in FACS buffer and acquire the sample on a flow cytometer.

10:29

Bir Yüksek verim Uyumlu Deneyi Makrofaj, pasajlamaya karşı ilaç etkinliğini değerlendirmektir Mycobacterium tuberculosis

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:43

M1 ve M2 İnsan Monosit Türevi Hücrelerin Polarizasyonu ve Mikobakteri Tüberküloz Enfeksiyonu Üzerine Akış Sitometrisi ile Analiz

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:27

Monosit-Makrofaj Testi Kullanılarak Kırmızı Kan Hücresi Antikor Öneminin Tahmini

İlgili videolar

0 Görüntüler

18:07

Çoklu-spektral Görüntüleme Akım Sitometri tarafından Nanopartiküller ve Bakterilerin Hücresel İçselleştirilmesi Analizi

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:48

Makrofaj Reseptörü Etkileşimlerinin Bakteriyel Antijenlerle Araştırılması için Flüoresans Tabanlı Analiz

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:21

İntrasellüler ve Acil Ekstraselüler Listeria monocytogenes'in In Vitro Flow Sitometri Analizi

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:18

Mycobacterium tuberculosis ile Enfekte Makrofaj Alt Popülasyonlarının Akış Sitometrisi Boyaması

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:25

Tüm hücre MALDI-TOF Kütle Spektrometre Makrofaj Aktivasyon Farklı Modu analiz için Doğru ve Hızlı Yöntem

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:43

Akış Sitometresi ile Merkezi Sinir Sisteminden Mikroglia ve Monosit Türevi Makrofajların Analizi

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:20

Akış sitometrik ölçüm makrofajlar FcγR Cross-linking yanıt ROS üretim

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 15 Ağustos 2026