Name: Farelerde Akut Akciğer Hasarı tetikleyebilecek Basınç Kontrollü Havalandırma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-05T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Keşfedin, farelerde basınç kontrollü mekanik ventilasyonla akut akciğer hasarı modeli oluşturma yöntemini. Trakeotomi, kateterizasyon ve bronkoalveoler lavaj sıvısı toplama adımlarını öğrenin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<p class="jove_content"&gt; Mevcut çalışmalar, Ulusal Kalp, Akciğer ve Kan Enstitüsü Hibe R01-HL0921, HK Eltzschig R01-DK083385 ve R01HL098294, T. Eckle 1K08HL102267-01, ve Anestezi Eğitim ve Araştırma T. Eckle Hibeler Vakfı tarafından desteklenen HK Eltzschig ve Amerikan Kalp Derneği, T. Eckle ve HK Eltzschig ve M. Koeppen Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) araştırma bursu Grant.</p

Genel notlar: Tüm işlemler, dik bir diseksiyon mikroskobu (Olympus, STU2 Standı Boom Stand ile Z-Eksen Crank Post SZX10) altında bir cerrahi koagülatör (11) kullanılarak yapılmalıdır. Deneysel gruplar sonuçlarının karşılaştırılabilirliği sağlamak için en iyi yaş ve ağırlığı mümkün olduğunca uyumlu olmalıdır. Sıcaklık, kan basıncı, anestezi ve sıvı yönetimi boyunca sabit olmalıdır. 1. Anestezi ve trakea hazırlık <ol><li> Kullanın ve en az 10 hafta eski C57BL / 6 fareler 22-25 g. bir vücuda sahip. Anestezi neden doz 70 mg / kg vücut ağırlığı ip (6) pentobarbital sodyum kullanarak. Yaklaşık pentobarbital 10 mg / kg / saat sodyum ile anestezi koruyun. Bu kan basıncını önemli ölçüde azaltabilirsiniz doz aşımı ile dikkatli olun. Pentobarbital yeniden dozlama sonra bile plazma düzeylerinde ciddi artışlara yol saat-. </li><li> Sonra anestezi indüksiyonu, bir teyp ve ayak bileklerine kadar bağlanmış bir dikiş kullanarak tabloya bağlı üst ve alt ekstremite ile yatar pozisyonda güvenli fareler. Dişler kullanarak kafa için de aynı işlemi yapın. Yeterli frenleyici başarılı bir entübasyon ve iyi kontrollü bir cerrahi için önemlidir. Ameliyat öncesinde, fare saç alerji riskini azaltmak için, mineral yağ ile fare kaplayın. Vücut ısısı, piyasada bulunan gıda ambalajlarında farelerin kapağı sabit kalmasını sağlamak için. </li><li> 37 vücut ısısını korumak için termal geribildirim denetleyicisine bağlı bir rektal termometre probu ile sıcaklık kontrollü ısıtmalı masa (RT, Effenberg, Münih, Almanya) ° C Yeri fareler </li><li> Trakeanın cerrahi Açığa. Bağ dokusu yer ve iki 3.0 ipek cerrahi sütür (Harvard cihazları, ABD) her 10 cm altında uzun trakea trakea lateral ve dorsal taraf parçalara ayır. Sütür dışında yaklaşık 1 cm olmalıdır. </li><li> McPherson-Vannas Makas (Dünya Hassas Aletler, ABD 8 cm, düz bıçak) kullanarak iki dairesel kıkırdaklar arasındaki gırtlak altında 4 mm - dikkatlice trakea 3 insizyon. Kanamaya neden bu sonuç parametreleri etkileyebilecek, emin olun. </li><li> Trakeal entübasyon künt polietilen kanül (Insyte 22g, Beckton Dickinson, ABD) kullanarak gerçekleştirin. Polietilen kanül ucu trakea içine 85 derecelik bir açıyla yerleştirin. Trakeal lümen böylece Sonra kanüller yatırın. Kanül ucu toraks diyafram kayboldu kadar tüp trakea aşağı yavaşça ilerler. Trakea (bkz. 1.4) dorsal yerleştirilen iki cerrahi ipek sütür ile bu pozisyonda tüp sabitleşmek. </li></ol> 2. Ventilatöre bağlı akciğer hasarı Tekniği <ol><li> Tüpün bir vantilatör bağlayın. Akciğer hasarına neden için Servo 900 C, Siemens (PRM Veteriner, ABD) kullanılarak bir basınç kontrollü ventilasyon tekniği kullanır . Hayvanlar FiO 2 = 1.0 ile 80 nefes / dk 45 mbar, frekans pik inspiratuar basınç ve 0-3 mbar bir pozitif ekspirasyon sonu basınç ile havalandırılmalıdır. Ilham sona erme oranı 1:1 olmalıdır. Servo 900 C, insanlar için vantilatör olarak inşa olduğu gerçeğine rağmen, bir basınç kontrollü ventilatör ortamda kullanılması farelerin havalandırma için mükemmel çalışır. </li><li> Monitör EKG (örneğin, Hewlett Packard, B blingen, Almanya) ile kalp atım hızı. Kalp hızı 400 altına düştüğü olmadığından emin olun. Bir mekanik ventilasyon intratorasik basınç artışı takiben artan pulmoner arter basınçları bir işareti olarak tesis sağ kalp eksen kayması, göreceksiniz. Fare bradikardi oluşursa, sıcaklık ve anestezi dozu / konsantrasyon kontrol edin. Xylacin / Ketamin anestezisi 250 / dk bir kalp neden olur ve bu nedenle tavsiye edilmez. </li><li> Uygun bir sıvı replasmanı uygulayın. Olan bir infüzyon serum fizyolojik 0.1 ml / saat arteriyel ya da venöz kateter yoluyla yeterli venöz dosyalama sağlamak için havalandırma önce yapılmalıdır. Ortalama arter basıncında önemli bir düşüşe yol açabilecek yüksek havalandırma basınçları, kalbe venöz dönüş bozulur nedeniyle. Ayrıca, 500 ul tuzlu bolus cerrahi öncesi ip verilebilir. </li><li> Karotis arter kan basıncı (27) sürekli kayıt için bir kateter yerleştirin. Arter diseksiyon başlamadan önce vücut kol takın. Karotis arter paratrakeal kasların künt diseksiyon ile maruz kalmaktadır. Daha fazla maruz kalma ve herhangi bir doku travması (özellikle vagal sinir) dikkatli kaçınma ardından, iki sütür ve küçük bir kelepçe (37) ile damar içine bir kateter yerleştirilir. Bu arter uzun bir segment gösterecektir. Karotis arter en sonunda bir ligatür yerleştirin. Gerginlik veya sabitleşmek inci elde etmek için dikiş sonuna kadar büyük bir kelepçe takınbant kullanarak tablo e dikin. Arter çevresinde başka bir dikiş yerleştirin ve çok distal ucu arter disseke. Burada, küçük bir kelepçe yerleştirin. Arter içine bir küçük çapraz açılış kesmek için mikro makas kullanın. Ince bir forseps (Dumont, TEFE) ile açılış tutun ve ellerinizi / forseps ile uygun büyüklükte kateter önceden. Ikinci sütür ile düğüm yapın ve arter güvenli. Kelepçe gevşetin ve kateter daha önceden. Kateter birkaç knot ve bant ile sabitleyin. Alternatif olarak, karotis arter kateter arter kan gazı analizi için kan örnekleri toplamak için deney sonunda yer olabilir. </li></ol> 3. Kurtarma doku örneklerinin 3 saat sonra mekanik ventilasyon, örnekler, akciğer hasarı ölçüde değerlendirmek için toplanır. Brochnoalveolar lavaj sıvısı (BAL), arteryel kan ve akciğer dokusunda toplayarak öneririz. <ol><li> Deneyin sonunda BAL sıvı alın. Anestezi derinleşen sonra, 1 ml fosfat ile trakeal tüp yıkayın tuzlu su (PBS) tamponlu. Bağlı enjektör ile kurtarma önce sıvı üç saniye için trakea / akciğer kalmalıdır. BAL, sıvı nitrojen içinde snap-dondurulmuş ve -80 ° C'de daha fazla analiz için saklanır. Kurtarılan hacmi 1 ml önemli ölçüde daha az olabileceğini farkında olun. </li><li> Deney sonunda kan gazı analizi yapın. Bunu yapmak için, bir kesi sağ sternum altında yapılmalıdır. Forseps ve göğüs kafesi boyunca kesi ölçüde ile sternum tutun. Daha sonra, diyaframın kenarlarında kazıma ve kaburga dışarı kesilir. Şimdi alt toraks boşluğuna açık bir görüş vardır. Forseps ile sternum yukarı kaldırın ve tam anterior toraks duvar-koğuşta kadar açık olduğunu, sağ ve sol tarafında uzun kesintiler (mümkün olduğunca lateral) göğüs kafesi açmak. Deneysel hayvan hala mekanik ventilasyon ise bu yapılmalıdır. Sol ventrikül, 27 delinirse ½ G iğne ve arteryel kan analizi i-STAT Sistemi (Abbott, USA) kullanılarak yapılır. Bu sonuç önemli bir karıştırıcı olacağından, arteryel kan gazı analizi yapılmalıdır BAL, elde edilebilir değildir. </li><li> Alternatif Yukarıdaki yöntem, arteryel kan örnekleri karotis arter kateter yoluyla toplanabilir. Ancak BAL elde önce yapılmalıdır. </li><li> Kalp yukarı çekerek ve trakea kesmek Vergi akciğerlerin en blok. Kan emmek için hazır bir doku parçası vardır, cerrahi sitesi görünür. Karın yönünde kalp çekin ve tüm torasik organlar dikkatli bir şekilde harekete geçirmek için, omurga boyunca kesilir. Aort Kes, torasik organlar kaldırmak ve temiz bir cerrahi masanın üzerine koyun. </li><li> Kalp ve büyük damar doku örneği kesip. Hiçbir timus dokusu hala akciğere bağlı olduğundan emin olun. Bireysel boru ve ek dondurucu bir makas ve yer ile akciğerlere ayırın. Daha fazla analiz için -80 ° C'de saklayın. </li></ol> 4. Akciğer hasarı ölçümü Biz akciğer hasarı ölçüde değerlendirmek için aşağıdaki sonuç parametreleri kullanmanızı tavsiye ederim: albümin ELISA (Bethyl Laboratories, USA) ve bariyer disfonksiyonu ölçüde ve inflamatuar miktarını değerlendirmek için bir miyeloperoksidaz (MPO) ELISA (Hycult Biyoteknoloji, ABD) yapın BAL sıvısı hücre. Da akciğer dokusunda MPO ELISA gerçekleştirin oluşturur. Islak-kuru oranı ölçülecek ise BAL sıvısı elde yoktur ve pulmoner dolaşım (3.3) kızarmış değildir. Eksizyon sonrası akciğer ağırlığı ölçün. Sonra akciğerler 48 saat ve akciğer dokusunun yeniden ölçülür için liyofilize. Sonra ıslak-kuru oranı kuru doku mg başına düşen su mg (5) olarak ölçülür. <img src="/files/ftp_upload/2525/2525fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. Protein içeriği VILI. Fareler yanıt BAL pentobarbital ile anestezi, mekanik ventilasyon tesis edildi ve fareler, basınç kontrollü ayarları (45 mbar inspiratuar basınç, son exspiratory pozitif basınç 3 mbar, ilham% 100 kullanarak havalandırılan oksijen konsantrasyonu). 0 1, 2 ve 3 saat sonra, havalandırma BAL, hasat ve protein içeriği bicinchoninic asit tayini (BCA tahlil) kullanarak sayısal oldu. Protein içeriği göreceli değişim havalandırma 0 saat normalize gösterilir (n = 4 grup başına, * p &lt;0.05, kontrole göre gösterir, ortalama ± SEM )

<ol><li>Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Laucher, S., Thompson, L. F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A2B+adenosine+receptor+dampens+hypoxia-induced+vascular+leak%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">A2B adenosine receptor dampens hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 2024-2035 (2008).</li>
<li>Eckle, T., Fullbier, L. G. renz, A,, Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+pressure-controlled+ventilation+at+high+inspiratory+pressures+to+induce+acute+lung+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Usefulness of pressure-controlled ventilation at high inspiratory pressures to induce acute lung injury in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295, 718-724 (2008).</li>
<li>Eckle, T., Fullbier, L., Wehrmann, M., Khoury, J., Mittelbronn, M., Ibla, J., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+ectonucleotidases+CD39+and+CD73+in+innate+protection+during+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Identification of ectonucleotidases CD39 and CD73 in innate protection during acute lung injury.</a> J Immunol. 178, 8127-8137 (2007).</li>
<li>Eckle, T., Grenz, A., Kohler, D., Redel, A., Falk, M., Rolauffs, B., Osswald, H., Kehl, F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+evaluation+of+a+novel+model+for+cardiac+ischemic+preconditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Systematic evaluation of a novel model for cardiac ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 2533-2540 (2006).</li>
<li>Eckle, T., Grenz, A., Laucher, S., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A2B+adenosine+receptor+signaling+attenuates+acute+lung+injury+by+enhancing+alveolar+fluid+clearance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">A2B adenosine receptor signaling attenuates acute lung injury by enhancing alveolar fluid clearance in mice.</a> J Clin Invest. 118, 3301-3315 (2008).</li>
<li>Eckle, T., Krahn, T., Grenz, A., Kohler, D., Mittelbronn, M., Ledent, C., Jacobson, M. A., Osswald, H., Thompson, L. F., Unertl, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardioprotection+by+ecto-5%27-nucleotidase+%28CD73%29+and+A2B+adenosine+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cardioprotection by ecto-5'-nucleotidase (CD73) and A2B adenosine receptors.</a> Circulation. 115, 1581-1590 (2007).</li>
<li>Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenosine%3A+an+old+drug+newly+discovered%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Adenosine: an old drug newly discovered.</a> Anesthesiology. 111, 904-915 (2009).</li>
<li>Eltzschig, H. K., Eckle, T., Mager, A., Kuper, N., Karcher, C., Weissmuller, T., Boengler, K., Schulz, R., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATP+release+from+activated+neutrophils+occurs+via+connexin+43+and+modulates+adenosine-dependent+endothelial+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">ATP release from activated neutrophils occurs via connexin 43 and modulates adenosine-dependent endothelial cell function.</a> Circ Res. 99, 1100-1108 (2006).</li>
<li>Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Furuta, G. T., Leonard, M. O., Jacobson, K. A., Enjyoji, K., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordinated+adenine+nucleotide+phosphohydrolysis+and+nucleoside+signaling+in+posthypoxic+endothelium%3A+role+of+ectonucleotidases+and+adenosine+A2B+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Coordinated adenine nucleotide phosphohydrolysis and nucleoside signaling in posthypoxic endothelium: role of ectonucleotidases and adenosine A2B receptors.</a> J Exp Med. 198, 783-796 (2003).</li>
<li>Eltzschig, H. K., Kohler, D., Eckle, T., Kong, T., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+role+of+Sp1-regulated+CD39+in+hypoxia%2Fischemia+protection%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Central role of Sp1-regulated CD39 in hypoxia/ischemia protection.</a> Blood. 113, 224-232 (2009).</li>
<li>Frick, J. S., MacManus, C. F., Scully, M., Glover, L. E., Eltzschig, H. K., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+adenosine+A2B+receptors+to+inflammatory+parameters+of+experimental+colitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Contribution of adenosine A2B receptors to inflammatory parameters of experimental colitis.</a> J Immunol. 182, 4957-4964 (2009).</li>
<li>Grenz, A., Eckle, T., Zhang, H., Huang, D. Y., Wehrmann, M., Kohle, C., Unertl, K., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+hanging-weight+system+for+isolated+renal+artery+occlusion+during+ischemic+preconditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Use of a hanging-weight system for isolated renal artery occlusion during ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 292, 475-485 (2007).</li>
<li>Grenz, A., Osswald, H., Eckle, T., Yang, D., Zhang, H., Tran, Z. V., Klingel, K., Ravid, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Reno-Vascular+A2B+Adenosine+Receptor+Protects+the+Kidney+from+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Reno-Vascular A2B Adenosine Receptor Protects the Kidney from Ischemia.</a> PLoS Medicine. 5, e137-e137 (2008).</li>
<li>Grenz, A., Zhang, H., Eckle, T., Mittelbronn, M., Wehrmann, M., Kohle, C., Kloor, D., Thompson, L. F., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+role+of+ecto-5%27-nucleotidase+%28CD73%29+in+renal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Protective role of ecto-5'-nucleotidase (CD73) in renal ischemia.</a> J Am Soc Nephrol. 18, 833-845 (2007).</li>
<li>Grenz, A., Zhang, H., Hermes, M., Eckle, T., Klingel, K., Huang, D. Y., Muller, C. E., Robson, S. C., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+E-NTPDase1+%28CD39%29+to+renal+protection+from+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Contribution of E-NTPDase1 (CD39) to renal protection from ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 21, 2863-2873 (2007).</li>
<li>Grenz, A., Zhang, H., Weingart, J., von Wietersheim, S., Eckle, T., Schnermann, J. B., Kohle, C., Kloor, D., Gleiter, C. H., Vallon, V., Eltzschig, H. K., Osswald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+effect+of+extracellular+adenosine+generation+and+signalling+on+renal+erythropoietin+secretion+during+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lack of effect of extracellular adenosine generation and signalling on renal erythropoietin secretion during hypoxia.</a> Am J Physiol Renal Physiol. , (2007).</li>
<li>Haeberle, H. A., Durrstein, C., Rosenberger, P., Hosakote, Y. M., Kuhlicke, J., Kempf, V. A., Garofalo, R. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxygen-independent+stabilization+of+hypoxia+inducible+factor+%28HIF%29-1+during+RSV+infection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Oxygen-independent stabilization of hypoxia inducible factor (HIF)-1 during RSV infection.</a> PLoS ONE. 3, e3352-e3352 (2008).</li>
<li>Hart, M. L., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Robson, S. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SP1-dependent+induction+of+CD39+facilitates+hepatic+ischemic+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">SP1-dependent induction of CD39 facilitates hepatic ischemic preconditioning.</a> J Immunol. 184, 4017-4024 (2010).</li>
<li>Hart, M. L., Henn, M., Kohler, D., Kloor, D., Mittelbronn, M., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+extracellular+nucleotide+phosphohydrolysis+in+intestinal+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Role of extracellular nucleotide phosphohydrolysis in intestinal ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 22, 2784-2797 (2008).</li>
<li>Hart, M. L., Jacobi, B., Schittenhelm, J., Henn, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+Edge%3A+A2B+Adenosine+receptor+signaling+provides+potent+protection+during+intestinal+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cutting Edge: A2B Adenosine receptor signaling provides potent protection during intestinal ischemia/reperfusion injury.</a> J Immunol. 182, 3965-3968 (2009).</li>
<li>Hart, M. L., Kohler, D., Eckle, T., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+treatment+of+mouse+or+human+blood+with+soluble+5%27-nucleotidase+inhibits+platelet+aggregation%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct treatment of mouse or human blood with soluble 5'-nucleotidase inhibits platelet aggregation.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28, 1477-1483 (2008).</li>
<li>Hart, M. L., Much, C., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+adenosine+production+by+ecto-5%27-nucleotidase+protects+during+murine+hepatic+ischemic+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Extracellular adenosine production by ecto-5'-nucleotidase protects during murine hepatic ischemic preconditioning.</a> Gastroenterology. 135, 1739-1750 (2008).</li>
<li>Hart, M. L., Much, C., Kohler, D., Schittenhelm, J., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+hanging-weight+system+for+liver+ischemic+preconditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Use of a hanging-weight system for liver ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 294, 1431-1440 (2008).</li>
<li>Hartmann, H., Eltzschig, H. K., Wurz, H., Hantke, K., Rakin, A., Yazdi, A. S., Matteoli, G., Bohn, E., Autenrieth, I. B., Karhausen, J., Neumann, D., Colgan, S. P., Kempf, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-independent+activation+of+HIF-1+by+enterobacteriaceae+and+their+siderophores%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-independent activation of HIF-1 by enterobacteriaceae and their siderophores.</a> Gastroenterology. 134, 756-767 (2008).</li>
<li>Heinzelmann, F., Jendrossek, V., Lauber, K., Nowak, K., Eldh, T., Boras, R., Handrick, R., Henkel, M., Martin, C., Uhlig, S., Kohler, D., Eltzschig, H. K., Wehrmann, M., Budach, W., Belka, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Irradiation-induced+pneumonitis+mediated+by+the+CD95%2FCD95-ligand+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Irradiation-induced pneumonitis mediated by the CD95/CD95-ligand system.</a> J Natl Cancer Inst. 98, 1248-1251 (2006).</li>
<li>Koeppen, M., Eckle, T., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+deletion+of+the+A1+adenosine+receptor+abolishes+heart-rate+slowing+effects+of+intravascular+adenosine+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Selective deletion of the A1 adenosine receptor abolishes heart-rate slowing effects of intravascular adenosine in vivo.</a> PLoS One. 4, e6784-e6784 (2009).</li>
<li>Kohler, D., Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Mittelbronn, M., Laucher, S., Hart, M. L., Robson, S. C., Muller, C. E., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD39%2Fectonucleoside+triphosphate+diphosphohydrolase+1+provides+myocardial+protection+during+cardiac+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">CD39/ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1 provides myocardial protection during cardiac ischemia/reperfusion injury.</a> Circulation. 116, 1784-1794 (2007).</li>
<li>Kuhlicke, J., Frick, J. S., Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+Inducible+Factor+%28HIF%29-1+Coordinates+Induction+of+Toll-Like+Receptors+TLR2+and+TLR6+during+Hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Hypoxia Inducible Factor (HIF)-1 Coordinates Induction of Toll-Like Receptors TLR2 and TLR6 during Hypoxia.</a> PLoS ONE. 2, e1364-e1364 (2007).</li>
<li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Kuhlicke, J., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1-dependent+repression+of+adenosine+kinase+attenuates+hypoxia-induced+vascular+leak%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">HIF-1-dependent repression of adenosine kinase attenuates hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 5571-5580 (2008).</li>
<li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Nivillac, N. M., Coe, I. R., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-inducible+factor-dependent+repression+of+equilibrative+nucleoside+transporter+2+attenuates+mucosal+inflammation+during+intestinal+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-inducible factor-dependent repression of equilibrative nucleoside transporter 2 attenuates mucosal inflammation during intestinal hypoxia.</a> Gastroenterology. 136, 607-618 (2009).</li>
<li>Reutershan, J., Vollmer, I., Stark, S., Wagner, R., Ngamsri, K. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenosine+and+inflammation%3A+CD39+and+CD73+are+critical+mediators+in+LPS-induced+PMN+trafficking+into+the+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Adenosine and inflammation: CD39 and CD73 are critical mediators in LPS-induced PMN trafficking into the lungs.</a> FASEB J. 23, 473-482 (2009).</li>
<li>Schingnitz, U., Hartmann, K., Macmanus, C. F., Eckle, T., Zug, S., Colgan, S. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Signaling+through+the+A2B+adenosine+receptor+dampens+endotoxin-induced+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Signaling through the A2B adenosine receptor dampens endotoxin-induced acute lung injury.</a> J Immunol. 184, 5271-5279 (2010).</li>
<li>Thompson, L. F., Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Van De Wiele, C. J., Resta, R., Morote-Garcia, J. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crucial+role+for+ecto-5%27-nucleotidase+%28CD73%29+in+vascular+leakage+during+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Crucial role for ecto-5'-nucleotidase (CD73) in vascular leakage during hypoxia.</a> J. Exp. Med. 200, 1395-1405 (2004).</li>
<li>Aherne, C. M., Kewley, E. M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+resurgence+of+A2B+adenosine+receptor+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">The resurgence of A2B adenosine receptor signaling.</a> Biochim Biophys Acta. , (2010).</li>
<li>Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+extracellular+adenosine+in+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%28Bethesda%29%22%5BJournal%5D)">Role of extracellular adenosine in acute lung injury.</a> Physiology (Bethesda). 24, 298-306 (2009).</li>
<li>Koeppen, M., Feil, R., Siegl, D., Feil, S., Hofmann, F., Pohl, U., de Wit, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((cGMP-dependent+protein+kinase+mediates+NO-+but+not+acetylcholine-induced+dilations+in+resistance+vessels+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">cGMP-dependent protein kinase mediates NO- but not acetylcholine-induced dilations in resistance vessels in vivo.</a> Hypertension. 44, 952-955 (2004).</li>
</ol>

Bu çalışmada farelerde ventilatöre bağlı akciğer hasarı yapan bir teknik açıklar. Bu model, yüksek basınçlı havalandırma nedeniyle yüksek tekrarlanabilir yaralanma göstermektedir. Farelerde akut akciğer hasarı okullar Müfettişler bu model yararlanabilir.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifin Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> Pentobarbital Sodyum (Fatal Plus,) </td><td> Vortech İlaç Ls, Ltd. </td><td> VPL 9372 </td><td> Içinde 4mg/mL serum fizyolojik </td></tr><tr><td> Insyte 22 G </td><td> Beckton Dickinson </td><td> n / a </td><td></td></tr><tr><td> Dikiş, ipek 4.0 </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 517698 </td><td></td></tr><tr><td> Dikiş, Prolen 8.0 </td><td> Ethicon, ABD </td><td> M8739 </td><td> yeniden kullanılabilir </td></tr><tr><td> Siemens, 900 ° C </td><td> PRM Veteriner, ABD </td><td> # 336 </td><td> yenilenmiş </td></tr><tr><td> diseksiyon mikroskobu (SZX10) </td><td> Olympus </td><td> n / a </td><td> geniş çalışma mesafesi düşünün </td></tr><tr><td> Isıtma Tablo </td><td> Rt, Effenberger, Almanya </td><td> n / a </td><td> sadece ve tek bir sağlayıcı </td></tr><tr><td> Kan basıncı cihazı </td><td> Cyber ​​Sense, Inc. </td><td> BPM02 </td><td></td></tr><tr><td> Ben STAT </td><td> Abbott </td><td> n / a </td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde akut akciğer hasarı tetikleyebilecek basınç kontrollü havalandırma

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Sıçan modellerinde farklı organların sistemleri (1-34) akut yaralanmalar kapsamlı araştırmak için kullanılır. Uzamış mekanik ventilasyon ile ortaya çıkan akut akciğer hasarı (ALI), kritik hastalık morbidite ve mortalite katkıda bulunur ve yeni genetik veya farmakolojik hedefler üzerinde çalışmalar yoğun bir soruşturma alanlarda (1-3, 5, 8, 26, 30, 33 -36). ALİ non-kardiyak pulmoner ödem ve pulmoner gaz değişimi (36) sonraki bozukluğu neden olan hastalık, akut başlangıçlı tarafından tanımlanır. Biz ventilatöre bağlı akciğer hasarı (2) ikna etmek için bir basınç kontrollü ventilasyon ile ALI bir fare modeli geliştirdiler. Bu amaçla, C57BL / 6 fareler anestezi ve mekanik ventilasyon ile ALI indüksiyon bir trakeotomi takip yapılır. 3 saat - Fareler üzerinde 45 mbar 1 inspiratuar tepe basıncı ile basınç kontrollü bir ortamda havalandırılan. Sonuç parametreleri, pulmoner ödem (ıslak-kuru oranı), bronkoalveoler sıvı albümin içerik, bronkoalveoler sıvı ve akciğer dokusunda miyeloperoksidaz içeriği ve pulmoner gaz değişimi (2) değerlendirilir. Bu tekniği kullanarak Yeteri kadar akut akciğer iltihabı neden olur ve farklı tedavi grupları ya da genotipler (1-3, 5) ayırt edebilirsiniz gösterebilirim. Bu nedenle bu tekniğin ALİ gen hedefli bir silme ile farelerde genetik bir yaklaşım kullanarak ilgili moleküler mekanizmaları takip araştırmacılar için yararlı olabilir.

Ventilatöre bağlı akciğer hasarı için bir fare modeli akut akciğer hasarı incelemek için önemli bir araçtır<em&gt; In vivo</em&gt;. Burada, kolay uygulanabilir rapor<em&gt; In situ</em&gt; Yüksek basınçlı mekanik ventilasyon akut akciğer yetmezliğine yol kullanarak akut akciğer hasarı modeli.

Farelerde Akut Akciğer Hasarı tetikleyebilecek Basınç Kontrollü Havalandırma

Fare modelleri, farklı organ sistemlerinin akut yaralanmalarını incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır (1-34). Uzun süreli ... ile meydana gelen akut akciğer hasarı (AAH),

Bu prosedürün genel amacı, bir ventilatör kullanarak farelerde akciğer hasarı oluşturmaktır. Bu işlem, trakeotomi gerçekleştirilerek ve yüksek basınçlı mekanik ventilasyon uygulanarak tamamlanır. Ardından, hemodinamik parametreleri ölçmek için bir karotis arter kateteri yerleştirilir.Hayvan, akciğer hasarı oluşması için yeterli süre boyunca ventilatöre bağlı kaldıktan sonra, arteriyel kan örnekleri ve bronkoalveolar lavaj sıvısı toplanır. Prosedürün son adımı, ileri analizler için akciğer dokusunun alınmasıdır. Nihayetinde, toplanan örneklerdeki değişikliklerin mekanik ventilasyon süresiyle korelasyonunu gösteren sonuçlar elde edilebilir.Bu tekniğin LPS inhalasyonu gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, insanlarda görülen akut solunum sıkıntılı sendromun tüm temel özelliklerine benzeyen bir akut akciğer hasarı oluşturmasıdır. Başlamak için, anestezi uygulanmış bir fareyi sıcaklık kontrollü ısıtmalı bir masa üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin; her ekstremitenin etrafına dikiş malzemesiyle halkalar oluşturun ve ardından dikişleri masaya bantlayın. Daha sonra, üst dişlerin altından bir dikiş geçirerek başı sabitleyin.500 µL'lik salin bolus uygulayın ve vücut sıcaklığının 37 °C'de kalmasını sağlamak için termal geri bildirim kontrolörüne bağlı bir rektal prob yerleştirin. Hazırlık tamamlandıktan sonra, tüylerden kaynaklanan alerjenlere maruz kalmayı azaltmak için fare mineral yağ ile kaplanabilir. Son olarak, vücut sıcaklığının korunmasına yardımcı olmak için hayvanı ticari olarak satılan gıda streç filmi ile sarın.Trakeyi açığa çıkarmak için boy boyunca bir insizyon yapın ve çevre kas ile bağ dokusunu kör diseksiyonla ayırın. Trakenin altına, yaklaşık bir santimetre arayla iki adet 10 santimetre uzunluğunda cerrahi sütür yerleştirin. Laringsin yaklaşık üç ila dört milimetre altına, iki kıkırdak halka arasından trakeyi dikkatlice insize etmek için mc first ve Vanna makası kullanın.Entübasyonu tamamlamak için, küt uçlu bir polietilen kanülün ucunu 85 derecelik bir açıyla trakeaya yerleştirin. Ardından, kanülü trakeal lümenle aynı hizaya gelecek şekilde eğin. Tüpün ucu toraks açıklığında kaybolana kadar tüpü yavaşça ilerletin.Tüpü, daha önce trakeanın altına yerleştirilen iki cerrahi sütür ile sabitleyin. Son olarak, tüpü ventilatöre bağlayın. Akciğer hasarı, Siemens marka servo 900 C ile oluşturulur.Basınç kontrollü bir ventilasyon tekniği kullanarak, peak inspiratuar basıncı 45 millibar, frekansı dakikada 80 soluk, pozitif ekspirasyon sonu basıncını sıfır ila üç millibar ve fraksiyonel inspiratuar oksijeni bir olarak ayarlayın; inspirasyon-ekspirasyon oranı bir birdir. Hayvan ventilatöre başarıyla bağlandıktan sonra, kan basıncı ve kalp hızını ölçmek için karotis arterine bir kateter yerleştirilir. Kol önce gövdenin yan tarafına sabitlenirse, arterin daha uzun bir parçası açığa çıkarılacaktır.Öncelikle, karotis arterini açığa çıkarmak için paratrakeal kasları künt diseksiyonla ayırın; arter izole edildikten sonra arterin proksimal ucuna bir sütür atın ve bir klemple veya bantla sabitleyin. İlk sütürden yaklaşık bir santimetre uzağa ikinci bir sütür yerleştirin ve arter çevresine düğümleyin ancak sütürü sıkmayın. Arteri en distal uca kadar dissekt edin ve kan kaybını önlemek için küçük bir klemple kapatın.Mikro makas kullanarak, ikinci sütürün üzerindeki artere küçük bir diyagonal açıklık açın. Kateteri yerleştirirken açıklığı ince pensle tutun ve yerinde sabit kalması için düğümü sıkın. Ardından, klempi gevşetin ve kateteri daha ileriye sürün.Kateteri ikinci süturun ötesine ilerletin. Kateteri birkaç düğüm ve bantla sabitleyin. Kateter yerleştirildiğinde, saatte 0.1 milliliter hızla normal salin infüze edin ve kateteri kan basıncı ölçüm cihazına bağlayın.Son olarak, kalp hızını izlemek için ekstremitelere klempler takın. Üç saatlik mekanik ventilasyonun ardından, akciğer hasarının boyutunu ölçmek için örnekler toplanır. İlk olarak, kan gazı analizi için karotis arter kateterinden örnekler alın.Anestezi seviyesi derinleştirildikten sonra, ventilatör bağlantısını kaldırın ve bir mililitre fosfat tamponlu salin ile doldurulmuş bir şırınga yerleştirin. Şırıngayı boşaltın ve bronkoalveoler lavaj sıvısını tekrar şırıngaya toplamadan önce üç saniye bekleyin. Geri kazanılan hacmin bir mililitreden önemli ölçüde daha az olması gerektiği unutulmamalıdır.Flash.Bronkoalveoler lavaj sıvısını sıvı azotta dondurun ve -80 °C'de saklayın. Akciğerleri izole etmek için önce sternumun hemen altına bir insizyon yapın. Sternumu forsepsle tutun ve insizyonu göğüs kafesi boyunca uzatın. Ardından, toraksin alt açıklığını net bir şekilde görebilmek için diyaframı kenarlardan ve kaburgalardan uzaklaşacak şekilde kesin.Sternumu pensle yukarı kaldırın ve sağ ile sol taraftan uzun kesikler atarak toraksı açın; tüm ön toraks duvarının yukarı doğru katlanabilmesi için kesikleri mümkün olduğunca lateral tutun. Beş mililitre PBS ile doldurulmuş bir şırıngaya 27,5 gauge bir iğne takın. İğneyi sağ ventriküle yerleştirin ve akciğerler tamamen beyazlaşana kadar arteriyel dolaşımı yıkayın.Eğer bu gerçekleşmezse, iğne ucunun sağ ventriküle doğru yerleştirildiğinden emin olun ve gerekirse yeniden konumlandırın. Kalbi yukarı çekip trakeayı keserek akciğerleri ve bloğu çıkarın. Görüşünüzü engelleyen kanı emmek için doku parçaları kullanın.Kalbi abdomen yönüne doğru çekin ve tüm torasik organları mobilize etmek için omurga boyunca dikkatlice kesin. Aortu kesin ve torasik organları temiz bir cerrahi masaya yerleştirin. Kalbi kesin ve örnek üzerindeki tüm ana damarları temizleyin.Akciğere hala yapışık timus dokusu kalmadığından emin olun. Akciğer loblarını ayırıp ayrı tüplere yerleştirin, hızla dondurun ve ileri analizler için -80 °C'de saklayın.Burada görüldüğü üzere, bronkoalveoler lavaj sıvısındaki protein içeriği ventilasyon süresi arttıkça artmaktadır. Protein içeriğindeki göreceli değişim, akciğer hasarının boyutunu değerlendirmek amacıyla sıfır saatlik ventilasyona normalize edilerek gösterilmiştir. Albümin ve miyeloperoksidaz için ELISA uygulanmış ve BAL sıvısındaki inflamatuar hücreler sayısal olarak belirlenmiştir.

pressure-controlled-ventilation-to-induce-acute-lung-injury-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu protokol, insanlarda gözlenen asit pnömonisinin patogenezine yakın olan bir farede akut akciğer hasarına neden olur. Maksimum akut ölümcül olmayan düşük pH'lı akciğer hasarı oluşturuyoruz ve çevresel basınç salınımı ile birlikte açık bir trakeostomi kullanarak kemirgen-insan anatomik solunum yapısındaki farklılıkları açıklıyoruz.

Akut Akciğer Hasarı Açık Trakeostomi Gastrik Asit Aspirasyon Fare Modeli Maksimal Akut Ölümcül olmayan Akciğer Hasarı Sonuçlar

Burada sunulan bir adım-adım prosedür doğrudan intratrakeal lipopolisakkarid instilasyon tarafından fareler akut akciğer hasarı neden ve kan örnekleri, Bronkoalveoler Lavaj sıvısı ve akciğer dokusu FACS analizi gerçekleştirmek için. Minimal invasiveness, basit kullanım, iyi reproducibility, ve hastalık şiddeti titrasyon bu yaklaşımın avantajlarıdır.

Doğrudan Intratracheal Lipopolysaccharide Instilasyon ile farelerde akut akciğer hasarının İndükleme

Farelerde sol akciğere selektif bronşiyal asit instillasyonu, gastrik asit aspirasyonu ile indüklenen insan akut solunum sıkıntısı sendromunu (ARDS) modelleyen tek taraflı ve kendi kendine sınırlı akut akciğer hasarına yol açar.

Tek Taraflı Bronşiyal Asit İnstillasyonu ile Kendi Kendine Sınırlı Akut Akciğer Hasarı Modeli

Kombine ozon ve bakteriyel endotoksin maruz fareler nötrofiller de dahil olmak üzere geniş yayılmış hücre ölümü gösterir. Sitoskeletal lamellipodia'nın bozulması, karmaşık V ATP sintaz alt β birliğinin hücresel ekspresyonunun artması ve bronko-alveoler lavajda anjiyostatin, akciğer immün yanıtının baskılanması ve nötrofil alımının gecikmesi gibi hücresel adaptasyonları gözlemledik.

Kombine Ozon ve LPS kaynaklı Murine Akut Akciğer Hasarı Sırasında Akciğer Hücresel Adaptasyonlarının Görselleştirilmesi

%0,9 tuzlu su (35 mL/kg vücut ağırlığı, 37 °C) ve düşük PEEP ile yüksek gelgit hacmi havalandırması kullanılarak yapılan yüzey aktif madde yıkama kombinasyonu, orta derecede ventilatör kaynaklı akciğer yaralanmasına (VILI) neden olur ve deneysel akut solunum sıkıntısı sendromu (ARDS) ile sonuçlanır. Bu yöntem, çeşitli ventilasyon stratejilerinin etkisini uzun süre incelemek için düşük / sınırlı işe alınabilirlik ile akciğer yaralanmasının bir modelini sağlar.

Yüzey Aktif Madde Tükenmesi, Akut Solunum Sıkıntısı Sendromunun (ARDS) Tekrarlanabilir Bir Modeliyle Birlikte Yaralanmalı Havalandırma ile Birleşti

İntravital floresan mikroskopi, lökosit-endotel etkileşimlerini ve kılcal perfüzyonu gerçek zamanlı olarak incelemek için kullanılabilir. Bu protokol, vakumla stabilize edilmiş bir akciğer görüntüleme sistemi kullanarak pulmoner mikrosirkülasyondaki bu parametreleri görüntüleme ve ölçme yöntemlerini açıklar.

Vakumla Stabilize Edilmiş Bir Görüntüleme Sistemi Kullanılarak Deneysel Akut Akciğer Hasarında Pulmoner Mikrosirkülasyonun İntravital Geniş Alan Floresan Mikroskopisi

Bu el yazması, farelerde enfeksiyöz bir pnömoni modelinin oluşturulmasını ve bakteri yetiştirme ve intratrakeal damlatma yöntemleri ile birlikte yaralanma çözünürlüğünün ilgili karakterizasyonunu açıklamaktadır. Bağışıklık ortamını değerlendirmek için yüksek boyutlu akış sitometrisi kullanan yeni bir yaklaşım da açıklanmaktadır.

Pnömoni Çözünürlüğünü Değerlendirmek için Deneysel Model

Ventilasyonu korurken ve hipoksiden kaçınırken sol akciğer iskemisi reperfüzyonu (IR) hasarı oluşturmak için bir fare cerrahi modeli.

Orotrakeal Entübasyon ve Ventilasyonlu Akciğer İskemisi Reperfüzyon Cerrahisinin Bir Fare Modeli

Burada, noninvaziv orofaringeal endotrakeal entübasyon yoluyla intratrakeal lipopolisakkarit (LPS) doğumu için bir protokol öneriyoruz. Bu yöntem, hayvan için cerrahi prosedürün travmasını en aza indirir ve LPS'yi trakeaya ve daha sonra akciğerlere doğru bir şekilde iletir.

Farelerde Noninvaziv İntratrakeal Lipopolisakkarit Damlatma

Bu protokol, bronkopulmoner displazinin moleküler tetikleyicilerinin anlaşılmasını kolaylaştırmak ve terapötik translasyonu geliştirmek için yetersiz yüzey aktif madde miktarı, hiperoksi, yüksek basınçlı ventilasyon ve inflamasyon dahil olmak üzere erken akciğerde meydana gelen erken patojenik olayları modelleyen akut akciğer hasarının yenidoğan domuz yavrusu modelinin geliştirilmesini açıklar.

Prematüre Bebek Akciğerlerinin Erken Ortamını Yeniden Yaratan Yenidoğan Domuz Yavrusu Akut Akciğer Hasarı Modelinin Geliştirilmesi

Bu çalışmada, invaziv olmayan endotrakeal instillasyon tekniğinin, akciğerlere hassas LPS iletimi sağlamak için temel bir laringoskop kullanılarak sıçanlarda ALI geliştirdiği gösterilmiştir. LPS, laringoskop kullanılarak endotrakeal tüp aracılığıyla yerleştirilir. Akciğer yaralanmasının büyüklüğü birden fazla zaman noktasında değerlendirilir.

Kemirgenlerde akut akciğer hasarını indüklemek için lipopolisakkaridin invaziv olmayan endotrakeal uygulaması

Keşfedin, farelerde basınç kontrollü mekanik ventilasyonla akut akciğer hasarı modeli oluşturma yöntemini. Trakeotomi, kateterizasyon ve bronkoalveoler lavaj sıvısı toplama adımlarını öğrenin.

Farelerde Akut Akciğer Hasarı tetikleyebilecek Basınç Kontrollü Havalandırma

Daha fazla video keşfet