Name: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesinden Rat Beyin Mikro-disseksiyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 31 s
Description: Öğrenin, sıçan beynini mikro-disseksiyonla dört bölgeye ayırma tekniğini. Bu yöntem, RNA ve protein bütünlüğünü koruyarak sinirbilim araştırmalarında hassas doku örnekleri sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Adım 1 Kurulmuş protokollere göre sıçan Kurban. Kafatası beyin çıkarın ve buz durulayın soğuk DEPC herhangi bir yüzeye kan kaldırmak için Milli Q suyu tedavi. Adım 2 Soğuk metal plaka üzerine yerleştirin. , Sağ ve sol hemisfer beynin iki yarısı kesin. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_3/269_Figure-01.png" alt="269_Figure-01" width="474" height="224" /> Şekil 1. Sıçan yarımkürenin medial kesme pozisyonları Adım 3 Ilk kesim hemen sonra koku ampul toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_4/269_Figure-02.png" alt="269_Figure-02" width="564" height="145" /> Şekil 2. Olfaktör ampul diseksiyonu Adım 4 Bir bıçak ve bir Dumont No 5 forseps kullanarak, ikinci kesim sonra sağ frontal korteksin toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_5/269_Figure-03.png" alt="269_Figure-03" width="566" height="220" /> Şekil 3. Frontal korteks diseksiyonu Adım 5 Iki Dumont No.5 forseps yardımı ile üçüncü kesintisinden sonra sağ striatum (kaudat nükleus) toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_6/269_Figure-04.png" alt="269_Figure-04" width="555" height="208" /> Şekil 4. Striatum (kaudat nükleus) diseksiyonu Adım 6 Hipokampus toplamak için, beynin ventral tarafında koymak ve sonra hipokampus maruz Ortabeyin kaldırmak. Iki Dumont No.5 forseps kullanarak korteks, hipokampus parçalara ayır. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_7/269_Figure-05.png" alt="269_Figure-05" width="559" height="191" /> Şekil 5. Hippocampus diseksiyonu

<ol><li>Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).</li>
<li>Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).</li>
</ol>

Hayvanların Hong Kong Üniversitesi Eğitim ve Araştırma Canlı Hayvan Kullanımı (CULATR) Komitesi tarafından onaylanmış ve hayvan kullanımı için sağlık kuralları National Institutes göre araştırma hayvan kullanımı için protokole göre ele alınmıştır.

Beynin farklı bölgelerinde farklı nörodejeneratif hastalıklar ile ilişkilendirir. Hipokampus Alzheimer hastalığı ile ilgilidir Örneğin, frontal korteks ve striatum Parkinson hastalığı ile ilgili. Beynin hassas mikro diseksiyon hastalıklı bölgede mRNA ve protein değişiklikleri daha doğru algılamasına olanak sağlar.

<table><tbody><tr><td>Mikroskop</td><td>Olympus Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon aletleri</td><td></td><td></td><td>Metal plaka, pens, bistüri ucu vb. RNazı ortadan kaldırmak için alüminyum folyo ile tek tek sarılmış ve 180oC'de sekiz saat boyunca ısıtılmış. Kullanımdan önce buzla soğutulmuş.</td></tr></tbody></table>

rna veya protein ekstraksiyonu Özgül beyin bölgesi&#39;nden rat beyin mikro-disseksiyon

Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region

Mikro-disseksiyon içine sıçan beynin çeşitli bölgelerinde, farklı nörodejeneratif hastalıklar çalışma için son derece önemlidir. Bu video dört büyük beyin bölgelerinde mikro diseksiyon koku alma ampul, frontal korteks, striatum ve taze sıçan beyin dokusu hipokampüsteki göstermektedir. RNA ve protein doku bozulması önlemek için ilgili bölgelerde hızlı kaldırılması için yararlı ipuçları verilmiştir.

RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi&#39;nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

Sıçan beyninin çeşitli bölgelere mikro-diseksiyonu, farklı nörodejeneratif hastalıkların incelenmesi için son derece önemlidir. Bu video ...'yı göstermektedir.

Merhaba, ben Hong Kong Üniversitesi Anatomi Bölümü'nden Quint. Bugün, beyni dört ana bölgeye; prefrontal korteks, stratum ve hipokampusa nasıl mikro-diseke edeceğinizi tanıtacağım. Beyni nasıl disseke ettiğimizi gösteren şematik görüntü buradadır.Üç kesi bulunmaktadır. İlk kesi düzlemi, olfaktor bulb ile frontal korteksin bağlantı noktasındadır. İkinci kesi düzlemi, corpus callosum'un üzerindedir.Üçüncü kesit düzlemi, foniklerin ön ucundadır. Üç kesimden sonra, dört beyin yolu oluşacaktır. Sol tarafta bir faktör yer almaktadır.Sağ tarafta hipokampus bulunmaktadır. Frontal korteks, birinci kesi ile ikinci kesi arasında yer alır. Stratumun bir parçası olan kodlama nükleaz, taze beyin hemisferinde ikinci ve üçüncü kesi arasında bulunur.Öncelikle corpus callosum ve phonics'in tanınması çok önemlidir. Ardından üç kesim noktasını kolayca belirleyebiliriz. İlk kesim düzlemi, bir faktör bulbu ile frontal korteksin bağlantı noktasındadır.İkinci kesit düzlemi corpus callosum'un bir kısmında, üçüncü kesit düzlemi ise fornix'in ön ucundadır. Beyni mikroskop altında diseke edeceğiz. Diseksiyon aletleri buz üzerinde tutulur.Bu buzlu metal plakayı DEPC suyu ile duruladıktan sonra, beyni iki Eco y

micro-dissection-rat-brain-for-rna-or-protein-extraction-from

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Ayrık fare beyin bölgelerinin RNA ekspresyon profillemesi, hassas ve tekrarlanabilir bir doku toplama stratejisi gerektirir. Burada, hem koronal beyin kesitlenmesi hem de doku orajörü yardımıyla mikrodissection kullanan bir protokol açıklanmaktadır. Elde edilen örneklerden sağlanan toplam RNA'nın verimi ve kalitesi, özetlenen yöntemin kullanışlılığını doğrulamaktadır.

Toplam RNA İzolasyonu ve Alt Nesil Sıralama ve Kaynak gösterilmeden kullanılamaz Ayrık Fare Beyin Bölgeler Mikrodisseksiyon Sigara Lazer Yakalama Mikroskopi Yaklaşım

Biz TSSB hastalarının karakteristik nöroendokrin fonksiyonlarda kalıcı değişikliklere ve gecikmiş uzun vadeli, abartılı bir korku tepkisi, ortaya travma sonrası stres bozukluğu (TSSB) bir sıçan modelinde tarif. Hayvan modeli ve burada tarif edilen yöntemler, fakat mekanistik çevresel beyaz kan hücrelerindeki biyolojik olan hastalarda ölçülemez beyin çekirdeklerinde biyo, kutu arasında ilişki için yararlıdır.

TSSB, Nöral Hematolojik ve Davranış Bağlantılı Revealing için Hayvan Modelinde Biyobelirteçler

Bu video, ötenazi uygulanmış sıçanlardan beyin mikro damarlarını izole etme sürecini göstermektedir. Beynin diseksiyonunu, dokunun temizlenmesini ve mekanik sindirimi ve ardından mikro damarların saf fraksiyonunu izole etmek için tekrarlanan santrifüjlemeyi içerir.

Sıçan Beyninden Nörovasküler Ünitelerin İzolasyonuna Yönelik Bir Yöntem

Bu video, serotonin sendromundan etkilenen sıçan beyin dokusunda oligonükleotid probları kullanılarak serotonin reseptörü RNA sentezinin tespitini göstermektedir. Protokol, mikroskop altında serotonin reseptörü RNA ekspresyonunu görselleştirmek ve ölçmek için doku ön işlemi, prob hibridizasyonu, enzimatik tespiti içerir.

Sıçan Beyin Bölümlerinde RNA Ekspresyonunu İncelemek için Oligonükleotid Probları Kullanılarak Yerinde Hibridizasyon

Belirli bir doku hücrelerinin bir alt kümesi gen ifade analizi büyük bir sorun teşkil etmektedir. Bu makalede, lazer yakalama mikrodiseksiyon ile hızlı bir immün yöntemi birleştirerek belirli bir hücre popülasyonu yüksek kaliteli toplam RNA izole açıklamaktadır.

Hücre belirli alt gruplar RNA izolasyonu Hızlı immünoyaftalama ile birlikte Lazer yakalama mikrodiseksiyon kullanma

Burada, sıçan beyin yüzdeki yalıtım ve membran örnekleri hazırlanması için bir yöntemi açıklanmıştır. Bu iletişim kuralı örnekleri kabul edilebilir protein ile bireysel hayvanlardan verim zenginleştirilmiş microvessel üreten açık avantajı vardır. Örnekleri daha sonra beyin mikrovasküler endotel, sağlam protein analizleri için kullanılabilir.

Membran örnekleri taze izole sıçan beyin yüzdeki hazırlamak için basit ve tekrarlanabilir bir yöntem

Biz yetişkin bir fare beyin yarımkürenin farklı parçalanmış bölgelerinden mikroglia izolasyoniçin bir protokol sağlamak, tam uzunlukta transkripsiyon derin tek hücreli RNA sıralama için yarı otomatik kütüphane hazırlık izledi. Bu yöntem, sağlık ve hastalık mikroglia fonksiyonel heterojenite açıklığa kavuşturmak için yardımcı olacaktır.

Derin Tek Hücreli RNA Sıralamaiçin Bir Yetişkin Fare Beyin Yarımküre'den Bölgeye Özgü MikrogliaNın İzolasyon

Bu prosedür, ucuz ve yaygın olarak kullanılabilir araçları kullanarak yüksek kaliteli protein ve RNA elde etmek için ayrık dondurulmuş beyin bölgelerinin toplanmasını açıklar.

Downstream Analizleri için Dondurulmuş Kemirgen Beyin Bölgeleri Koleksiyonu

Fare beyninin çıkarılması ve taze beyin dokusundan ayrı bölgelerin diseksiyonu için uygulamalı, adım adım, hızlı bir protokol sunuyoruz. Moleküler analiz için beyin bölgelerinin elde edilmesi birçok sinirbilim laboratuvarında rutin hale gelmiştir. Bu beyin bölgeleri, sistem seviyesi analizi için yüksek kaliteli transkriptomik veriler elde etmek için hemen dondurulur.

Fare Beyninin İşlevsel ve Anatomik Olarak Farklı Bölgelere Mikrodiseksiyonu

Lazer yakalama mikrodiseksiyonu ve mikroakışkan RT-qPCR kombinasyonu, tek nöronlarda ve gliada transkriptomun ölçülmesinde anatomik ve biyoteknik özgüllük sağlar. Psikiyatrik hastalığa bir sistemin biyoloji yaklaşımı ile yaratıcı yöntemler uygulamak, bağımlılıkta nöroinflamasyon antireward hipotezi gibi anlayış ve tedavide atılımlara yol açabilir.

Bağımlılık Davranışında Antireward Sürücülerinin Anatomik Olarak Spesifik Tek Hücreli Gen İfade Yöntemleri ile İncelenmesi

Öğrenin, sıçan beynini mikro-disseksiyonla dört bölgeye ayırma tekniğini. Bu yöntem, RNA ve protein bütünlüğünü koruyarak sinirbilim araştırmalarında hassas doku örnekleri sağlar.

RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

Daha fazla video keşfet