Name: İnferior Vena Kava Trombozu Fare Komple Durağanlık Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 34 s
Description: Öğrenin inferior vena kava ligasyonu ile farelerde tam durağanlık modeli oluşturmayı. Bu yöntem trombüs oluşumu, çözünme ve akut kronik inflamasyon geçişini incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Fare Anestezi Prosedürleri <ol><li> Hayvanlar, kendi kafesinden dakikada 0.5 litre (buharlaştırıcı kontrollü) bir akış hızında kaldırılır ve izofluran% 5 ve% 100 oksijen gazı indüksiyon için ameliyat öncesi anestezi indüksiyon odasına yerleştirilir. </li><li> Fare, anestezi indüksiyon odasında sedasyon odasına çıkarıldı ve ventral karın saç tüy dökücü (1dk) kullanılması durumunda elektrik kesme makineleri ile traş, ya da odanın içinde korunur. </li><li> Hala sedasyon altında, tartılır, gözler, izofluran ve oksijen kullanarak bir burun konisi, steril oftalmik merhem ile yağlanır ve daha sonra, genel anestezi altında dolaşan bir sıcak su ısıtma cihazı dorsal recumbancy yerleştirilir. Bu noktada, dakikada 0.2 litre oksijen oranı azalır. </li><li> Karın klorheksidin solüsyonu ile püskürtülür (klorheksidin diasetat hızla bacterialcidal ve kalıcı) ve steril gazlı bez ile üç kez sildi ya da cerrahi bölge temiz olana kadar. </li></ol> 2. Fare Mikro-cerrahi ve Kurtarma Prosedürleri <ol><li> Ventral orta hat insizyonu (2cm), deri ve karın duvarı ile karın açığa iris makası ile yapılır. , Bir steril serum fizyolojik batırılmış 2x2in gazlı bez bağırsaklarda hayvanın sol tarafında yansıtmak için kullanılır. Bir fare süzgeç görselleştirme izin inferior vena kava (IVC) yerine konur. </li><li> Bu noktada,% 2 isoflurance ve 0.2 litre / dk% 100 oksijen oranı, bir bakım seviyesi cerrahi işlemin geri kalanı için kullanılır. </li><li> Künt diseksiyon steril bir aplikatör çubukla ve ekstra hassas iris yarım kavisli doku forseps kullanarak kolaylaştırılır. Bakım son derece kırılgan olduğu için fare dokuları ele alınmalıdır. IVC görüntüleme sağlayan, böylece karın boşluğuna girdikten sonra steril örtüyü üzerine bağırsaklarında yansıtacak ve exteriorize, steril bir tuzlu batırılmış 4x4in gazlı bez kullanın. </li><li> Yan dalları, non-reaktif 7-0 prolen sütür ile bağlandı ise bütün böbrek damarları iliak bifurkasyon IVC arka dalları, koterize. </li><li> IVC, böbrek damarları sadece alt, aort ayrılır. 7-0 prolen IVC Arter için kullanılır. </li><li> Iki katmanlı bir moda laparotomi sitesi kapalı. Laboratuvarımız sürekli bir desen 5-0 Vicryl, sentetik dikiş, karın duvarı kapatmak için kullanır. Yapışkan deri tutkal cilt kapatmak için kullanılır. Çıkarılması için herhangi bir dış sütür vardır. </li><li> Fare, daha sonra bireysel bir fare kafes içinde ele, bir ısıtma lambası (minimum mesafe 24 inç uzakta kafes) altında (2 saat 45 dakika) ameliyat sonrası gözlenen, daha sonra kendi özgün konut döndü. Bu çalışmanın amacı engel değilse, ağrı kesici ilaçlar ve anti-inflamatuar ajanlar kullanılabilir. Bilimsel ağrı kesici ilaçlar alıkoyma gerekçesi, veteriner ve ICUCA onayına ihtiyaç vardır. Laboratuvarımız Buprenorfin, 0.05-0.1 mg / kg SQ fareler için mükemmel bir pre-ve post-operatif ağrı kesici olduğunu tespit etmiştir. Lidokain az 4mg/kg (0.4 ml / kg% 1 solüsyon) ek olarak, sistemik analjezikler deneysel sonuçlar karıştırıcı kesi yeri aşılanan. </li><li> IVC veya herhangi bir drenaj dalları bağlandı veya koterize değildir hariç, her deney grubundan Şam hayvanların cerrahi yaklaşım için kullanılan yukarıdaki diseksiyon tabi. </li><li> Ötenazi, kemirgenler için Ötenazi Amerikan Veteriner Tıp Derneği Kuralları tarafından belirlenen tavsiyelere uygun olarak yapılır. </li></ol>

<ol><li>Naess, I. A., Christiansen, S. C., Romundstad, P., Cannegieter, S. C., Rosendaal, F. R., Hammerstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+and+mortality+of+venous+thrombosis%3A+a+population-based+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Incidence and mortality of venous thrombosis: a population-based study.</a> J Thromb Haemost. 5, 692-699 (2007).</li>
<li>White, R. H., Keenan, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+race+and+ethnicity+on+the+incidence+of+venous+thromboembolism%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of race and ethnicity on the incidence of venous thromboembolism.</a> Thromb Res. 123, Suppl 4. S11-S17 (2009).</li>
<li>Heit, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+venous+thromboembolism+in+the+community%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of venous thromboembolism in the community.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28, 370-372 (2008).</li>
<li>Henke, P. K., Varga, A., De, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+vein+thrombosis+resolution+is+modulated+by+monocyte+CXCR2-mediated+activity+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Deep vein thrombosis resolution is modulated by monocyte CXCR2-mediated activity in a mouse model.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 24, 1130-1137 (2004).</li>
<li>McDonald, A. P., Meier, T. R., Hawley, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+is+associated+with+impaired+thrombus+resolution+in+a+mouse+model+of+stasis+induced+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Aging is associated with impaired thrombus resolution in a mouse model of stasis induced thrombosis.</a> Thromb Res. 125, 72-78 (2010).</li>
<li>Myers, D., Farris, D., Hawley, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selectins+influence+thrombosis+in+a+mouse+model+of+experimental+deep+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Selectins influence thrombosis in a mouse model of experimental deep venous thrombosis.</a> J Surg Res. 108, 212-221 (2002).</li>
<li>Myers, D. D., Hawley, A. E., Farris, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((P-selectin+and+leukocyte+microparticles+are+associated+with+venous+thrombogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">P-selectin and leukocyte microparticles are associated with venous thrombogenesis.</a> J Vasc Surg. 38, 1075-1089 (2003).</li>
<li>Myers, D. D. J. r, Rectenwald, J. E., Bedard, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+venous+thrombosis+with+an+oral+inhibitor+of+P+selectin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Decreased venous thrombosis with an oral inhibitor of P selectin.</a> J Vasc Surg. 42, 329-336 (2005).</li>
</ol>

İnferior Vena Kava Trombozu Fare Komple Durağanlık Model değişik yaştaki farelerin birden fazla suşları yapılabilir. Bu model en az 20 gram ağırlığı farelere en çok uygundur. Bu hayvan modelinde venöz tromboz, araştırmacılar, damar duvarı ve oklüzif venöz trombüs arasındaki inflamatuar etkileşimleri çalışmak için izin verir. Deneyimlerimizi, biz grup başına 10 veya daha fazla hayvan trombüs ağırlıkları, damar duvarının inflamatuvar hücre sayımı, damar duvarı protein, damar duvarı gen ekspresyonu ve aktivitesi için tam k...

<table border="1"><tbody><tr><td> Sarf Malzemeleri ve Ekipmanları </td></tr><tr><td> İsofluranın gaz </td></tr><tr><td> Prolen 7-0 sütür </td></tr><tr><td> Vicryl 5-0 sütür </td></tr><tr><td> Cilt tutkal </td></tr><tr><td> Göz madeni </td></tr><tr><td> Nolvasan Çözüm ya da bakteriyostatik çözüm </td></tr><tr><td> Stereomikroskopta kapsamı </td></tr><tr><td> MediCapture </td></tr><tr><td> Pamuk Aplikatörler </td></tr><tr><td> 2x2 tül </td></tr><tr><td> Isıtma yastığı </td></tr><tr><td> Anestezik makine </td></tr><tr><td> Cam boncuk enstrüman sterilizatör </td></tr><tr><td> Mikro cerrahi aletler </td></tr><tr><td> Karın Restrainers </td></tr></tbody></table>

İnferior vena kava trombozu fare komple durağanlık model

Mouse Complete Stasis Model of Inferior Vena Cava Thrombosis

Venöz tromboemboli (VTE), derin ven trombozu (DVT) ve pulmoner emboli (PE) içerir. Amerika Birleşik Devletleri (ABD), yüksek morbidite ve mortalite oranları ciddi bir sağlık sorunu 1-2 VTE olun. VTE, kalp hastalığı ve inme sonrası üçüncü en yaygın damar hastalığı 3. Sadece ABD&#39;de her yıl etkilenen 300.000 ölüm yılda 3 oluşan, yaklaşık 900.000 kişi var. Bu hastalığın mekanizmaları incelemek için güvenilir bir in vivo hayvan modeli gereklidir. Inferior vena kava trombozu fare tam durağanlık modeli kullanmanın avantajları çok sayıda vardır. Fare modeli, maliyetleri önemli ölçüde azaltarak, sınırlı sayıda test ajanların çok küçük hacimli yönetim sağlar. En çok gelecek vaat eden spesifik inflamatuvar ve pıhtılaşma faktörü fonksiyonları belirlendi izin gen nakavt fareler için bir potansiyeldir. Şu moleküler deneyleri, damar duvarı, trombüs, tam kan ve plazma deneyleri için kantitatif için izin verir. Ancak, bu model ile ilgili büyük bir endişe ameliyat boyutu kısıtlamaları ve gemilerin kırılganlık. Ayrıca, küçük IVC örnek ağırlığı (ortalama 0.005 gram) sayesinde gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR), western blot gibi hayvansal doku için doğru istatistiksel analiz numaraları, trombüs ve kan testleri artırmak için gerekli enzyme-linked immunosorbent (ELISA), zymography, damar duvarı ve trombüs hücresel analiz ve tam kan ve plazma testleri 4-8. Staz modeli ile büyük bir dezavantaj, kan akışının olmaması, trombüs ve damar duvarı üzerinde uygulanan sistemik terapötik ajanlar maksimal etkisi inhibe ettiği.

Inferior vena kava trombozu fare tam durağanlık modeli ven duvar dokusu ve trombüs ölçülebilir miktarda verir. Bu damar duvar ve oklüzif trombüs arasındaki etkileşimleri ve akut ve kronik inflamasyon ilerlemesini değerlendirmek değerlendirmek için yararlı olduğu kanıtlanmıştır.

İnferior Vena Kava Trombozu Fare Komple Durağanlık Model

Venöz tromboembolizm (VTE), hem derin ven trombozunu (DVT) hem de pulmoner emboliyi (PE) kapsar. Amerika Birleşik Devletleri'nde (ABD), yüksek morbidite ve...

Bu prosedürün genel amacı, trombogenezi ve çözülmeyi incelemek amacıyla, tam bir staz ile sonuçlanan bir trombus oluşturmak için IVC'yi ligelemektir. Bu işlem, öncelikle ventral orta hat insizyonu ile IVC'nin açığa çıkarılmasıyla gerçekleştirilir. Ardından, tüm arka ve yan drenaj dalları tespit edilerek ya koterize edilir ya da ligelenir.Ardından IVC, renal venlerin alt kısmından aortadan ayrılır ve bağlanır. Son olarak, moleküler değerlendirme için IVC ve trombüs çeşitli zaman noktalarında toplanır. Nihayetinde, altıncı güne kadar olan trombüs yükünün derecesini gösteren sonuçlar elde edilebilir.İnferior vena cava ligasyonu fare modeli, gen silinmiş fareleri incelemek amacıyla laboratuvarımızda geliştirilmiştir. Bu protokolün gerçekleştirilmesi için gereken mikrocerrahi teknikler nedeniyle prosedür adımlarının öğrenilmesi zor olduğundan, bu cerrahi modelin görsel gösterimi kritik öneme sahiptir. Başlamak için, hayvanı %5 isof fluorine ve dakikada 0.5 litre hızında %100 oksijen içeren anestezi öncesi indüksiyon odasında anesteziye alın.Hayvanı hazneden çıkarın, hayvanı sırt üstü tutun ve ventral karnı elektrikli tıraş makinesi ile tıraş edin. Ardından hayvanı tartın. Daha sonra gözleri steril bir oftalmik pomad ile yağlayın.Genel anestezi altında, izofluran ve oksijen eşliğinde hayvanı sıcak su ısıtma pedine sırtüstü yerleştirin. Karın bölgesini klorheksidin çözeltisi ile püskürterek steril gazlı bezle silin. Cerrahi işleme başlamak için cerrahi alan temizlenene kadar karnı dezenfekte edin.İris makası kullanarak deri ve karın duvarı boyunca ventral orta hat kesisi yapın ve salinle ıslatılmış steril gazlı bez kullanarak abdomeni açığa çıkarın. Hayvanın bağırsaklarını sol tarafına doğru kaydırın. İnferior vena cava (IVC) veya CVA'yı açığa çıkarmak için bir fare sabitleyici kullanın.Bu adımdan itibaren cerrahinin geri kalanı boyunca; %2 isofluorine ve %100 oksijen ile, dakikada 0,2 litre hızında anesteziyi sürdürün. Steril bir pamuklu çubuk ve ekstra hassas iris doku pensi kullanarak, IVC ve tüm dallarını açığa çıkarmak için abdominal fasyanın künt diseksiyonunu gerçekleştirin.Önce, renal venlerden iliak bifurkasyona kadar olan tüm IVC arka dallarını koterize edin. Ardından, yan dalları 7-0 non-reaktif prolen sütürlerle ligatörleyin. IVC'yi, renal venlerin hemen altından aortadan ayırın.IVC'yi bağlamak için yedi sıfır proline sütürler kullanın. Karın duvarını beş sıfır Vicryl sentetik sütürler kullanarak kapatın. Ardından, cildi kapatmak için yapışkan cilt tutkalı uygulayın.Hayvanı ısıtıcı lamba altında bir iyileşme kafesinde izleyin, ardından hayvanı orijinal barınma ünitesine geri götürün. Bu analiz, kontrol fareleri ile ötanazi anında IVC ligasyonu ve tromboz geçirmiş hayvanları karşılaştırır. İkinci veya altıncı günde, IVC trombusu ve ilişkili ven duvarı çıkarılarak tartıldı.Trombüs ağırlığı ölçümü, araştırmacının tromboz derecesini ve zamanla gerçekleşen çözünme düzeyini belgelemesine olanak tanır. Bu ölçüm, endotel hücre aktivasyonu ile ilişkili inflamatuar olayın bir göstergesidir. Ayrıca, terapötik bir ajanın inflamasyonu ve ven duvarındaki trombüs miktarını azaltmadaki etkinliğinin faydalı bir göstergesidir. Burada, aorta ile birlikte IVC çıkarılmıştır.Parafinle gömülmüş kesitler lamlara alınmış ve hematoksilin ve eozin ile boyanmıştır. Bu grafik, kontrol grubuna karşı deneysel farelerin dokularındaki polimorfonükleer hücrelerin veya PMN'lerin sayısını göstermektedir. Ven duvarındaki inflamatuar hücre popülasyonlarının ölçümü, normal bir hayvanda venöz trombuslar varken ven duvarındaki doğal akut-kronik inflamatuar yanıtı belgelemek için kullanılır; ikinci gündeki akut inflamatuar yanıt ağırlıklı olarak nötrofillerden oluşmalıdır.Bu şekilde belirtildiği üzere, enfeksiyon mevcut değilse, ven duvarı nötrofil popülasyonu ikinci günden sonra azalmalıdır. Venöz tromboz fare modelimizde, burada ven duvarı monositlerinin sayısı karşılaştırılmaktadır.Daha subakut ve kronik ven duvarı inflamatuar yanıtında artışlar görülecektir. Ven duvarı monosit popülasyonlarında monositler, venöz trombüsün doğal çözünmesini teşvik ettiği gösterilen proteolitik enzimler salgılar. Enfeksiyon mevcut değilse zamanla, bu videodan sonra IVC ligasyon modelimizi nasıl uygulayacağınız konusunda artık iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.Bu model, trombogenezin ve trombüsün zamanla çözünmesinin incelenmesi için oldukça uygundur.

mouse-complete-stasis-model-of-inferior-vena-cava-thrombosis

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Venöz endotel aktivasyonu ve kısmi kan staz, Virchow triadı iki bileşeni nedeniyle tipi trombüs oluşumu inferior vena kava sonuçlarının iç yüzeyi endotel aktivasyon elektrolitik indüksiyon.

Ven Trombozu Elektrolitik inferior vena kava Modeli (EIM)

Bu video, sağ ortak karotis arteri bloke ederek ve fareyi düşük oksijenli bir ortama maruz bırakarak bir fare modelinde trombotik bir inmeyi çoğaltma prosedürünü göstermektedir. Bu işlem beyne giden kan ve oksijen akışını azaltarak kan pıhtısı oluşumuna ve beyin hasarına neden olur.

Bir fare modelinde hipoksi ve iskemi yoluyla trombotik inme inmesinin indüklenmesi

Burada Derin Ven Trombozu fare modeli olarak stenoz inferior vena kava içinde açıklayın. Bu model kan akışını kısıtlama, bir Venöz tromboz insanlarda büyük tetikler beyannamedir.

Inferior Vena kava stenozu: Derin Ven Trombozu fare modeli

Mevcut Protokolü Venöz tromboz Staz modelini kullanarak elde etmek için gereken adımları açıklar. Buna ek olarak, biz trombüsü oluşumu ve çözünürlük zamanla ölçmek için non-invaziv bir yöntem kullanarak.

Derin Ven Trombozu Staz farelerde yüksek frekans Ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen

Bir aokaval fistül, her iki duvar üzerinden Vena Cava inferior içine murine infra-renal aort delip tarafından oluşturuldu ve inferior vena cava kısmi ligasyon yoluyla onun çıkış bir stenoz oluşturulması izledi. Bu tekrarlanabilir model, Merkezi venöz stenozu incelemek için kullanılabilir.

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Burada, iplik embolizasyon yöntemiyle üstün sagittal sinüs (SSS) trombozunun Sprague-Dawley (SD) sıçan modeli romanı kurduk ve modelin stabilitesi ve güvenilirliği doğrulandı.<br...

İplik Embolisi Yöntemi ile Üstün Sagittal-Sinüs Oklüzyonunun Sıçan Modelinin Kurulması

Bu makale, venöz ligasyon elde etmek için vasküler klipsler kullanarak bir fare kanseri modelinde venöz trombozu değerlendirmek için optimize edilmiş bir yöntem sunmayı amaçlamaktadır. Optimizasyon, trombozla ilişkili ölçümlerdeki değişkenliği en aza indirir ve insan kanseriyle ilişkili venöz trombozla alaka düzeyini artırır.

Bir Fare Kanser Modelinde Venöz Tromboz Testi

Protokol, trombotik olmayan, trombotik ve trombotik sonrası derin venlerde venoplasti balonu (VB) müdahalelerini test etmek için bir sağkalım kemirgen modeli sunar.

Kemirgen İnferior Vena Cava Venoplasti Balon Modeli

Hücresel ve moleküler neotissue oluşumu hakkındaki bilgi geliştirmek için, TEVG bir fare modeli yakın zamanda geliştirilmiştir. Greftler C57BL / 6 farelerinde Infrarenal vena kava araya girme greft olarak implante edildi. Bu model bizim klinik araştırmada elde edilenlere benzer sonuçlar elde, ama çok kısaltılmış zaman zarfında.

Fare Modeli Inferior Vena Cava İnterpozisyon Greft İmplantasyonu

Kanser tümörü çevreleyen dokunun hem de yerel pro- ve anti-inflamatuar aracılar tarafından etkilenir kompleks bir hastalıktır. Bu nedenle, daha çok deri altı modellere göre ortotrop enjeksiyon modelleri, bir şekilde daha iyi taklit eden insan patoloji kanser ilerlemesinin incelemek için yararlı olabilir.

Farelerin Meme Fat Pad içine Meme Kanseri Hücreleri Ortotopik Enjeksiyon Tümör Büyüme Eğitim için.

Öğrenin inferior vena kava ligasyonu ile farelerde tam durağanlık modeli oluşturmayı. Bu yöntem trombüs oluşumu, çözünme ve akut kronik inflamasyon geçişini incelemek için kullanılır.

İnferior Vena Kava Trombozu Fare Komple Durağanlık Model

Daha fazla video keşfet