Manuel Tutucu ve Fare ve Sıçanlarda Ortak Bileşik İdaresi Rotalar

Aşağıdaki videonun genel amacı, izleyiciyi fare ve sıçanlarda manuel zapt etme ve bileşik uygulama için kullanılan çeşitli tekniklerle tanıştırmaktır. Fareler ve sıçanlar, bir veya iki elle uygulanan bir dizi teknikle veya plastik sabitleyiciler kullanılarak zapt edilebilir; intraperitoneal, subkutan, intravasküler ve intradermal gibi bileşik uygulama teknikleri mevcuttur. Bu videoda, enjeksiyon yöntemlerinin yanı sıra oral gavage ve intranazal uygulama da gösterilmektedir.

Hayvanların güvenli, nazik ve kendinden emin bir şekilde nasıl tutulacağını öğrenmek, in vivo araştırmaların önemli bir parçasıdır. Hayvanlar her zaman hem hayvan hem de araştırmacı için güvenli olacak bir şekilde tutulmalıdır. Genel olarak, kemirgenlerle çalışmaya alışmak zaman aldığı için bu yöntemlerde yeni olan kişiler başlangıçta zorluk çekebilirler.

Kemirgenler, kendileriyle çalışmaya yeni başlayan kişileri korkutabilir veya yıldırabilir. Doz uygulama ve zapt etme tekniklerinin görsel olarak gösterilmesi, hem bileşiğin başarılı bir şekilde uygulanması hem de hayvanın ve zapt eden kişinin stres yaşamasının veya yaralanmasının önlenmesi açısından kilit öneme sahiptir. Fareler, tek elli veya iki elli teknik kullanılarak manuel olarak zapt edilebilir.

Her iki yöntemin ilk adımı, fareyi kuyruk tabanından tutarak nazikçe kafes kapağı tel çubuğuna veya benzeri pürüzlü bir yüzeye kaldırmaktır. Tek el tekniği için, kuyruğu nazikçe geriye doğru çekerken kuyruk tabanını üçüncü ve dördüncü parmağınız arasına sıkıştırın. Bu işlem, farenin yüzeye tutunmasını ve öne doğru çekilmesini sağlayacaktır.

Ardından sıkıca tutun. Kuyruğu tutan aynı elle farenin ensesinden kavrayın. Başın tabanına yakın bölgeyi işaret parmağı ve başparmakla kavrayın ve orta ile yüzük parmaklarını da dahil ederek kavrayışınızı sırt boyunca aşağıya doğru genişletin.

Farelerin dönmesini veya kıvranmasını önlemek için boyun çevresindeki deriye yeterli basınç uyguladığınızdan emin olun, ancak hayvanın nefes alamayacağı kadar fazla basınç uygulamayın. İki elli teknik benzerdir; ancak bir el kuyruğu nazikçe geriye çekerken, diğer el fareyi ensesinden hızlı ve sıkı bir şekilde kavrar, böylece kuyruk bir elde, ense ise diğer elde tutulmuş olur. Fareyi kaldırın ve kuyruğun tabanını, ense tutan elin avuç içi ile üçüncü veya dördüncü parmağı arasına sıkıştırın.

Daha önce olduğu gibi, tutuşun güvenli olduğundan ancak hayvanın nefes almasına izin verdiğinden emin olun. Sıçan enseden tutma işlemi genellikle iki elle gerçekleştirilir. Öncelikle, sıçanı kafesinden çıkarın ve pürüzlü bir yüzeye yerleştirin.

Ardından, baskın olmayan elinizle sıçanı kuyruğundan kavrayın ve çekin. Kuyruğu bir elle sıkıca tutarak nazikçe geriye doğru çekin ve diğer elinizle sıçanın ensesine arkadan yaklaşın. Kürek kemiklerine doğru ilerlerken sıçanın sırtına hafifçe baskı uygulayın.

Ve son olarak, enseden parmaklar ve el ayası ile kavrama. Sıçanlar bu şekilde zaptedildiklerinde ses çıkarabilirler. Omuz üzerinden tutuş yöntemini kullanırken, baskın el ile sıçanı kuyruğundan tutun ve nazikçe geriye doğru çekin.

Ardından, baskın olmayan eli arkadan yaklaşarak sıçanın sırtına yerleştirin. Sıçanı yüzük parmağı, serçe parmağı ve başparmak ile göğüs bölgesinden kavrayın. Sıçanın başı, işaret ve orta parmak arasında olmalıdır.

Bir diğer sabitleme yöntemi ise omuz altı tutuştur. Kuyruğu daha önce görüldüğü gibi dominant el ile kavrayın ve dominant olmayan eli arkadan yaklaşarak sıçanın sırtının üzerine yerleştirin. Ardından, sıçanı göğüs bölgesinden, kürek kemiklerinin hemen altından kavrayın.

Sıçanın ön kolları, başparmak ve işaret parmağı ile nazikçe yukarı doğru itilmelidir. Sıçanın ısırmasını önlemek için ön kollar, çenesinin altından çaprazlanmalıdır. Eğer vücut tutucuya karşı sabitlenirse, sıçan bu şekilde tek elle tutulabilir.

Kısıtlama amacıyla "de capic konisi" olarak adlandırılan ince plastikten yapılmış esnek, koni şeklinde bir parça da kullanılabilir. Hayvanı, burnu koninin ucundaki delikten çıkana kadar ileri doğru itin; ardından torbayı kuyruk etrafında kapalı tutun veya hayvanı sabit tutmak için bir lastik bant veya bükme bağ kullanın. Kısıtlama sağlandıktan sonra enjeksiyonlar plastik malzeme üzerinden uygulanabilir; kuyruğa erişim gerektiğinde ise sert plastik bir kap kullanışlıdır.

Sıçanı, cihaz üreticisinin belirttiği şekilde yerleştirin. Bu tip sabitleyicilerde sıçan, kuyruğundan tutularak nazikçe sabitleyicinin içine doğru çekilir. Cihazın ön kısmındaki kapatma mekanizmasını yerleştirin ve hayvanın hareketlerini kısıtlayacak şekilde ayarlayın.

Hayvanlar huzursuz görünüyorsa, hayvanın üzerine yerleştirildiğinde havlu ile sabitleme yöntemine başvurulabilir; havlunun sağladığı karanlık ve nazik sabitleme, hırçın bir sıçanı sakinleştirebilir. Havluyu nazikçe sıçanın üzerine yerleştirin ve ardından sıçanı gövdesinden dikkatlice kavrayın. Havluyu sıçanın burnunu kapatmadığınızdan emin olarak etrafına sarın.

Enjeksiyon yapılacak vücut bölümü açığa çıkacak şekilde havluyu kenara çekin. Aşağıdaki uygulama tekniklerinden herhangi birini gerçekleştirmeden önce, şırınga kullanımıyla ilgili pratik yapmak faydalıdır. İdeal olarak, bir el şırıngayı kontrol ederken diğer el hayvanı sabit tutmalıdır; iğneler, özellikle intravenöz enjeksiyonlar için, eğik ucu yukarı bakacak şekilde hayvana yerleştirilmelidir.

İnce ayar iğneler, flakon tıpalarına yerleştirildiğinde kolayca hasar görür. Materyalleri çekmek için daha geniş ayarlı bir iğne kullanın ve ardından enjeksiyon için bunu daha ince ayarlı bir iğneyle değiştirin. İntranazal uygulama, alerji ve astım çalışmalarındaki bazı enfeksiyöz ajan türleri için ve akciğerleri içeren bazı çalışmalarda kullanılır.

İntranazal uygulama, intratrakeal instillasyonun aksine anestezi ve cerrahi müdahale gerektirmez. İntranazal uygulama için hayvanı daha önce açıklandığı şekilde sabitleyin; bir şırınga veya pipet kullanarak solunacak materyalin küçük bir miktarını hayvanın burun deliklerine yerleştirin. Materyalin burun deliklerinden içeri girdiğinden emin olun ve gerekirse işlemi tekrarlayın.

Bileşikler, hızlı emilim gerektirdiklerinde ve çok küçük hacimlerde uygulanabildiklerinde intramüsküler olarak uygulanır. İntramüsküler enjeksiyonlar için zapt etme işlemi iki kişi gerektirebilir, çünkü bir arka bacağın enjeksiyon için serbest ve sabitlenmiş olması gerekir. İğneyi, hayvanın quadriceps veya lateral uyluk kas kütlesi üzerindeki deriye dik olarak yerleştirin.

Siyatik sinire zarar verme olasılığı nedeniyle posterior kas kütlesine enjeksiyon yapmamaya dikkat edin. Uygulanacak bileşik hacmi yüksekse ve emilim hızı kabul edilebilirse, oral uygulamaya yakın sonuçlar elde etmek için intraperitoneal uygulama tercih edilir.

İntraperitonal enjeksiyon yapmak için hayvanı sabitleyin ve burnunun ucunu yere doğru yönlendirin. Karın bölgesini açığa çıkarmak için hayvanın orta hattını belirleyin ve zihinsel olarak karnı kadranlara ayırın.

Alt kadranlarda, özellikle hayvanın sağ alt kadranında bir enjeksiyon bölgesi seçin; materyali hayvana enjekte etmek için uygun boyutlarda bir şırınga ve iğne kullanın. Bir maddenin deri altına uygulanması, yavaş emilim istendiği durumlarda tercih edilir.

Farelerin ve sıçanların geniş miktarda gevşek derisi olduğu için, insanlarla karşılaştırıldığında deri altına nispeten daha büyük hacimler enjekte edilebilir. Deri altı enjeksiyonlar için, hayvanı daha önce gösterildiği gibi hafifçe sabitleyin. Deriyi kavrayın ve nazikçe yukarı doğru çekin.

Uygun boyutlarda bir şırınga ve iğne kullanarak deri üzerinde bir çadır oluşturun, iğneyi 30 ila 45 derecelik bir açıyla çadır yapılan deriye yerleştirin ve materyali enjekte edin. Deri altında oluşan küçük bir şişlik, enjeksiyonun başarılı olduğunun göstergesidir. Subkutan enjeksiyondan sonra hayvanlarla rutin olarak çalışılacaksa, enseden tutma yöntemi kullanmayın.

Bunun yerine, sırt kalça bölgesindeki deriyi kullanın. Hayvanlara birden fazla deri altı enjeksiyon yapılacaksa, enjeksiyon bölgelerini değiştirin; hayvanların intradermal uygulama sırasında zapt edilmesi zor olabilir ve kimyasal sedasyon kullanımını gerektirebilir. Eğer bir anestezik kullanılırsa, bunun herhangi bir araştırma hedefiyle çelişmediğinden emin olun.

İntradermal enjeksiyon yaparken, öncelikle enjeksiyon bölgesindeki deri net bir şekilde görülebilecek şekilde tüyleri temizleyin. Uygun boyuttaki bir iğneyi 15 ila 30 derecelik bir açıyla deriye yerleştirin. İğneyi çok derine yerleştirmeyin.

Doğru şekilde yerleştirildiyse, enjeksiyon sırasında bir dirençle karşılaşılmalıdır. Enjeksiyon başarılı olduysa, çevreleyen deriden daha soluk olan küçük bir kabarcık görülecektir. Materyalin geri akışını önlemek için hafifçe bastırın.

İntravasküler uygulama çok çeşitli bileşikler için kullanılır ve bileşiğin uygun şekilde formüle edilebildiği ve çok hızlı bir etkinin istendiği durumlar için en iyi yoldur. Kuyruk yan venine yapılacak bir intravasküler enjeksiyon için, hayvanı bir dekapi konisinde veya plastik kemirgen sabitleyicide tutun. Daha önce gösterildiği gibi, hayvanın kuyruğunu düzeltmek ve döndürmek için baskın olmayan elinizle uç kısmından tutun. Kuyruk venlerini dorsal konuma getirmek için çeyrek tur döndürün.

Ventral kuyruk arterinden kaçınarak, enjeksiyon için iki lateral kuyruk veninden birini belirleyin. İğneyi 15 ila 20 derecelik bir açıyla kuyruğun distal kısmına yaklaştırın ve materyali enjekte edin. Başarılı bir enjeksiyonda materyal vene herhangi bir dirençle karşılaşmadan girecek ve enjeksiyon süresince kuyruk veninde beyazlaşma meydana gelecektir.

Enjeksiyonun daha distal bir noktaya yapılması, ilk denemenin başarısız olması durumunda kullanılabilecek damarın hasarsız bir kısmının korunmasını sağlar. İntragastrik uygulama veya oral gavaj, yalnızca sabitlenmiş uyanık hayvanlara uygulanır; çünkü anestezi veya sedasyon, aspirasyon riskini artırır. İnsan oral uygulaması için güvenlik testleri yapılan bileşikler sıklıkla bu yöntemle uygulanır. Uygun boyutta bir oral besleme iğnesi seçerek başlayın.

Uzunluk, sabitlenmiş hayvan yukarı tutularak ağız köşesinden ölçülerek belirlenir. Besleme iğnesinin top uçlu kısmı hayvanın son kaburgasına ulaşmalıdır; hayvanın başı ve vücudu düz bir dikey hat oluşturacak şekilde sabitleyin.

Bu işlem özofagusun düzleşmesini sağlayarak besleme iğnesinin daha kolay ilerlemesine olanak tanır. İğnenin küresel ucunu hayvanın ağzından, dilin üzerinden içeri yerleştirin. İğne yerleştiğinde, hayvanın burnu tavana doğru bakacak şekilde iğneyi ve şırıngayı damağa hafifçe bastırarak yukarı kaldırın.

İğne boğazın arka kısmından geçerken hafifçe yönlendirilmesi gerekebilir. İğne üzerindeki herhangi bir gerginlik, konumun ayarlanması gerektiğini gösterir; önceden belirlenen mesafeye ulaşana kadar iğneyi ilerletmeye devam edin. İğne kolayca geçmelidir ve hayvan nefesi kesilmiş gibi tepki vermemeli veya boğulmamalıdır, ardından maddeyi uygulayın.

Direnç görülürse veya hayvan nefes darlığı çekerse, boğulursa veya morarırsa işlemi derhal durdurun ve iğneyi çıkarın. Bu teknikler ustalıkla uygulandığında, hem sıçanlara hem de farelere güvenli bir şekilde doz uygulama ve onları etkili bir şekilde zapt etme imkanı sağlayacaktır. Bu prosedürleri uygularken, doğru şekilde zapt edilmiş bir hayvanın işlemi hem hayvan hem de uygulamacı için güvenli hale getirdiğini hatırlamak önemlidir.

Bilimde hayvanlarla çalışmanın bir ayrıcalık ve sorumluluk olduğunu unutmayın. Doğru zapt etme yönteminin ve uygun uygulama yollarının seçilmesi, hem bilimsel kalite hem de hayvan refahı açısından önemlidir.