Çekal ligasyon Delinme Prosedürü

Merhaba, ben Temple Üniversitesi Mikrobiyoloji ve Hematoloji bölümündeki Dr. Dena'nın laboratuvarından Miguel Toscano. Bugün size, C 57 Black Seas fare soyunda iCal allegation ve ponksiyon modelinin nasıl kurulacağını göstereceğiz. Laboratuvarımızda insan sepsisini taklit etmek için bu modeli kullanıyoruz.

Temel olarak bu model, polimikrobiyal sepsis oluşturmak ve böylece abartılı bir bağışıklık yanıtı meydana getirmek amacıyla, fekal materyalin peritoneal boşluğa salınmasını sağlayan bir serum delinmesinden oluşur. Bu modelde, birçok organ ve farklı hücre tipleri geri döndürülemez şekilde hasar görür. Bu durum sonuç olarak hayvanın ölümüne yol açabilir.

Hadi başlayalım. Fareye anestezi uygulanması. İlk adım, intraperitonal enjeksiyon yaparak hayvanı anestezi altına almaktır.

Ketamin ve ksilazin karışımı, bir bire bir oranında uygulanır. Farenin ısırmasını önlemek ve ona zarar vermemek için, fare bir elle kuyruğundan tutulmalıdır. Diğer elle ise fare sırtı yere gelecek şekilde bastırılır.

Ardından fareyi başının arkasından tutup, abdomen bölgesini açığa çıkarmak için hayvanı sırt üstü çevirebiliriz. 29 gauge'lik bir insülin şırıngasıyla, peritoneal kaviteye 20 ila 30 µL anestezi enjekte ediyoruz. Fareyi prosedüre hazırlamak için, farenin kuyruğunu ve/veya bacağını bastırarak sırtından tutun ve abdomen bölgesini tıraş edin.

Farede ağrıya karşı hassasiyet olup olmadığı kontrol edilir, ardından karın bölgesi dezenfekte edilir. İlk olarak Betadine solüsyonu ile fırçalama yapılır ve ardından en az bir dakika boyunca izopropil alkol mendil ile silme işlemi uygulanır. Laparotomi uygulaması için karnın orta kısmındaki deri forseps ile kaldırılır ve yaklaşık bir santimetre uzunluğunda küçük bir insizyon yapılır.

Ardından perineumu kaldırın ve peritoneal boşluğu açığa çıkarmak için başka bir küçük insizyon yapın. Kavisli pens kullanarak peritoneal membranı tutun. Çekumu, peritoneal membrandan geçirerek tanımlayın ve açığa çıkarın.

Karın bölgesinin üzerine yerleştirin. Şimdi ligasyon anıdır. Bu, önemli bir faktördür.

Modelin şiddetini belirlemek için prosedürün şiddetini modüle edebiliriz. Ligasyonun kapsamına bağlı olarak farelerde daha hafif bir sepsis gelişecektir. Ligasyon sekumun sonuna yakın yapıldığında orta derecede, ortada yapıldığında orta seviye ve ileosekal valfe yakın yapıldığında ağır bir sepsis oluşur; prosedürün şiddeti mortalite yüzdesi ile yansıtılacaktır.

İleosekal valfi asla bağlamayın. Şimdi, sıkı olması için ipek sütürle çift düğüm kullanarak ligasyonu gerçekleştirin ve delme işlemini yapın. Sekumu tutun ve ligasyon bölgesine yakın bir noktadan dikkatlice bir delik açın, ardından sekumun sonuna daha yakın bir noktadan başka bir delik açın. Sekum membranı yumuşaktır ve çok kolay bir şekilde delinebilir.

Farklı kalınlıktaki iğneler kullanarak ve bir veya iki perforasyon yaparak modelin şiddetini de modüle edebiliriz. Burada gösterilen tek veya çift ponksiyon yöntemi, klasik boydan boya sıralı ponksiyon yöntemine alternatif bir tekniktir. Tek veya çift ponksiyon yöntemini kullanmanın avantajı, sekum sıkıldığında dışarı çıkan dışkı miktarının daha iyi kontrol edilebilmesidir.

Sekumu her iki parmağınızla tutun ve çok küçük miktarda dışkı çıkarmak için sekumu nazikçe dışarı itin. Laparotomiyi kapatın, ardından peritonyumu kaldırın ve sekumu dikkatlice periton boşluğuna geri yerleştirin.

Sekumun yanlışlıkla delinmemesi için son derece dikkatli olun. Forseps kullanılırken daha büyük forsepslerin kullanılması önerilir. Şimdi periton boşluğunu kapatma zamanıdır. İpek sütür kullanarak, bölgenin çok iyi kapatıldığından emin olmanız oldukça önemlidir.

Yaranın bir tarafından başlayarak bir düğüm atarız. İpeği önceki deliğin halkasının altından geçirerek diğer tarafa kadar sütür yapmaya devam edin. Cildi kapatmak için, klipsleri kapatmak için uygun aleti kullanarak Mitchell yara klipsleri veya refleks klipsler kullanılabilir.

Yaranın kapalı olduğundan emin olmak için gerektiği kadar klips yerleştirin. Fareleri, deri altına bir mililitre önceden ısıtılmış salin çözeltisi enjekte ederek resüsite edin. 25 gauge iğne kullanılarak yapılan bu sıvı resüsitasyon önlemi, prosedürü tamamlayarak sepsisin hiperdinamik fazını başlatacaktır.

Fare, anesteziden ayılana kadar bir kızılötesi ısıtıcı lambanın altına veya alternatif olarak bir ısıtıcı pedin üzerine yerleştirin. Kafesin tabanına yem ve su sağlayın ve hayvanları hastalık belirtileri açısından her sekiz ila 12 saatte bir denetleyin. Postoperatif analjezi için deri altına buprenorfin enjekte edin.

Kullanılabilecek farklı bir analjezik T.Tramadol'dür. Sepsis belirtileri ve semptomları arasında ateş, letarji, pelo, ereksiyon, diyare, büzülme ve malaise yer alır. Çok hasta hayvanlarda vücut sıcaklığında ciddi bir düşüş görülür ve acı çekmemek için neredeyse hiç hareket etmezler.

Bu aşamada ötanazi uygulanmalıdır. Böylece, orak ligasyonu ve ponksiyon modelini nasıl gerçekleştirdiğimizi görmüş oldunuz. Umuyoruz ki bu prosedürün gösteriminden keyif almışsınızdır ve hayvan çalışmanıza başlamadan önce araştırmalarınız için bunu çok yararlı bulmuşsunuzdur. Ligasyon uzunluğunu, iğne kalınlığını ve ponksiyon sayısını değiştirerek deneyleriniz için uygun şiddet derecesini belirlemek amacıyla, eğitim için eski veya kullanılmamış fareler kullanmanızı şiddetle öneririz.

Bununla birlikte, hoşça kalın.