Name: Harici Alternatif Elektrik Alan Uyarılma ve Görüntü Analizi Yüksek hızlı bir kombinasyonu ile Dış Saç Hücre Motilite incelenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 35 s
Description: Öğrenin dış saç hücresi motilitesini incelemek için harici alternatif elektrik alanı uyarılması ve yüksek hızlı görüntü analizi yöntemini. Bu teknik işitme mekanizmalarını anlamak için güvenilir bir yaklaşım sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Ulusal Sağlık Grants R01DC10146/R01DC010397 Enstitüleri tarafından desteklenen çalışma, P30 DC006276 Araştırma Çekirdek NIDCD ve HEI. Burasının içeriği sadece yazarların sorumluluğundadır ve mutlaka NIH veya HEI resmi görüşlerini temsil etmemektedir. Yazarlar ilgi mevcut veya potansiyel çatışma beyan ederim.

1. OHCs, izolasyon <ol><li> Kobay, fare ya da memeli hayvan modeli temporal kemikler hasat bu yordamı başlayın. </li><li> Sonra, temporal kemikler koklea göstermek için bir malleus tokatlama kullanarak açın ve Leibovitz L-15 batırmayın. Kemik kabuk sağlam tutmak, kemik aşan dikkatlice çıkarın. Bu herhangi bir memeli türlerinin zamansal kemikler için geçerli genel bir prosedür olduğunu dikkate alarak çok küçük hayvanlardan elde edilen temporal kemikler ile uğraşırken, tekniği küçük değişiklikler gerekebilir. Eski hayvanlarda bül genellikle işlem için ek bir komplikasyon tanıtan, kalsifiye. </li><li> Mikroskobik gözlem altında, koklea apikal bölgenin stria vascularis ve spiral ligament # 11 neşter bıçak ucu kullanarak açın ve çıkarın, mikro noktası almak ve ince bir cımbız. </li><li> Cımbız kullanarak koklear modiolus Corti Organ çıkartın ve oda sıcaklığında 5 dakika boyunca L-15 1mg/ml kollajenaz koyun. </li><li> Koklea bazal döner OHCs gerekmesi durumunda, seçim ile kokleanın tabanını kaplayan kemiksi bir kabuk kaldırmak ve Corti Organ çıkarmadan önce neşter bıçak kullanarak temporal kemik spiral ayrı. </li><li> 50 mcL Hamilton şırınga kullanarak kayıt odasına Corti Organ aktarın. Daha sonra, iğne ile reflü hücreleri ayrıştırmaları. </li></ol> 2. Deneysel Kurulum <ol><li> Dış Alternatif Elektrik Alan (EAEF) jeneratör ve görüntü yakalama sistemi (Şekil 1) ile bağlantılar diyagramı. Kontrol devresi House Kulak Enstitüsü Mühendislik Çekirdeği özel hayata geçirildi. </li><li> Deneylerde kullanılan deney düzeneği alternatif bir LED tabanlı aydınlatma sistemi ile Axiovert 135TV inverted mikroskop (Zeiss, Thornwood, NY) oluşur (High Power LED Sistemi-36AD3500, Lightspeed Teknolojileri, Campbell, CA), iki elektronik mikromanipülatörler (Eppendorf "PatchMan", Almanya), Keller portu PC kontrollü bir ultra-yüksek hızlı Photron Fastcam X 1024 PCI kamera (Photron USA Inc) ve trinoküler liman, ek bir düzenli CCD kamera. Fastcam kamera görüntüleri, yüksek frekansları (100.000 fps'ye kadar) ve yüksek çözünürlüklü (örneğin, 1000 fps'de 1024 x 1024 piksel, 10.000 fps, 384 x 96 18.000 fps hızda 512 x 128, vb.) Yakalamak mümkün. CCD kamera farklı bir monitöre bağlı ise, yüksek hızlı kamera tarafından sağlanan görüntüleri doğrudan PC monitörü görülmektedir. Analog düşük güç tüketimi ve yüksek güç dijital LED tabanlı aydınlatma sistemi, iki farklı modda çalışır. Düşük güç analog modu kullanarak tüm ön işlemleri (elektrotlar konumlandırma, hücre konumlandırma, odak, vb.) Yapılmaktadır. Yüksek güç aydınlatma, kamera deklanşör diyafram açık ve daha sonra ısı dağılımını kolaylaştırmak, deklanşör kapatarak kapalı. Ev yapımı yazılım, aynı zamanda, aynı bilgisayarda çalışan House Kulak Enstitüsü Mühendislik Çekirdeği geliştirilen yüksek hızlı kamera, LED tabanlı aydınlatma sistemi, ve EAEF tetikleyici kontrol eder. Ön liman geleneksel dijital fotoğraf makinesi hala gerektiği gibi çerçeveler için izin verir. (Şekil 2). </li><li> Elektrotlar (iki ucu 0.8 mm mesafe ile 0.25 mm çapında Ag teller) elektronik mikromanipülatörler birini kullanarak pozisyon için tahrik edilmektedir. Elektrotlar 'konumunu görsel ve mikroskobik görüntü aracılığıyla izlenir; görüntünün odak düzlemli bir değişiklik elektrotlar deney odasının alt dokundu belirtir. Başlangıçta, elektriksel alan, harici bir elektrot kullanılarak kalibre edilir. Bu elektrot elektrik alanında bir "harita" üreten, farklı noktalarda elektrik potansiyelini ölçer. Izole tek bir dış tüy hücresi uygulanan EAEF uzun eksenine paralel elektrot uçları arasına yerleştirilir ise, uzatma ve elektrik alan aynı frekansta kısaltarak hareket edecektir. OHC yanıt (bükme) farklı türde bir hücre alanında dik yerleştirilmiş ise gözlenen ve araştırılmalıdır. (Şekil 2 B) </li></ol> 3. EAEF uyarılması ve görüntü yakalama <ol><li> Dört farklı stimülasyon protokolleri (Şekil 3) seçilebilir: <ol><li> sürekli tek bir frekans (Şekil 3). Uyaran modu, frekans, genlik ve dalga tipi ev yapımı kontrol yazılımı (kırmızı daireler) kullanılarak seçilebilir unutmayın. </li><li> bursted tek frekanslı (Şekil 3). Patlama arasındaki patlamaları ve boşlukların uzunluğu da seçilebilir. </li><li> lineer süpürme (Şekil 3 C). Ilk ve son frekansları seçilebilir. </li><li> çok stimülasyon (Şekil 3 D). Tek frekans ve doğrusal tarama, tek bir deney kombine edilebilir. İlgili parametreleri seçtikten sonra, kontrol yazılımı sistemi yapılandırır ve operatörün tek bir düğmeye tıklayarak ışık senkronize video kayıt ve hücre stimülasyon başlatmanıza izin verirbilgisayar ekranında. </li></ol></li><li> Görüntüler AVI formatında yüksek frekanslarda daha fazla analiz için yakalanır. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar <ol><li> Bu film, iki izole dış saç hücrelerinin kendi boyuna eksenine paralel veya çapraz Harici Alternatif Elektrik Alan, sırasıyla uyarılmış ediliyor uzunluk veya eğrilik değişiklikler göstermektedir. (Film # 2). </li><li> OHCs hareketli yanıtları-line ProAnalyst yazılım (Xcitex A.Ş., Cambridge, MA) kullanılarak analiz edilmektedir. Bu yazılım "Özellik İzleme" fonksiyonu kare-kare (Şekil 4) iki nokta arasındaki mesafe sağlar. Ve hücre (Bazal kutup, yeşil renkli) tabanı; apeks (kırmızı renk cuticular plaka) seçilen nokta arasındaki mesafeyi kısaltarak hücre sırasında küçük olduğu için, ve hücre uzaması ile birlikte artar. Filmi kare kare uzunluğunda değişiklikleri analiz yazılımları gösterir. Görüntünün altındaki panel hareketin iz gösterir. Bu örnekte, uzunluğu toplam değişim yaklaşık 6.5 piksel. </li><li> ProAnalyst yazılım "Kontur İzleme" fonksiyonu hücre kenar algılar ve otomatik olarak optik bölümü (Şekil 5) alanında ölçmek. </li><li> Polistiren mikroküreler rastgele banyo çözümü eklendi ve sıkıca plazma zarı (Şekil 6 A) eklemek. Farklı mikroküreler aynı anda seçilebilir ve yazılım otomatik olarak hepsini kare kare izleyebilirsiniz. Bu sayede, hücreler bölümlerde bölünmüş ve her bölümün motilite bağımsız olarak değerlendirilir. (Şekil 6 A) </li><li> Mikroküreler seçerek hücre görüntü lateral kenarlarında bulunan, her segmentin uzunluğu değişiklikler ve bir segmenti saygı açısı değişiklikleri (bükme) diğer bağımsız değerlendirilir olabilir. (Şekil 6B) </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2965/2965fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 EAEF jeneratör ve görüntü yakalama sistemi ile olan bağlantıları diyagramı. <img src="/files/ftp_upload/2965/2965fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Deney düzeneği Şekil 2) Resim. Elektrotlar ve tek bir OHC uzun eksenine paralel elektrik alanı ile bunlar arasında yer alan resmeden karikatürler mikroskop sahne B) Detay. <img src="/files/ftp_upload/2965/2965fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3 A), tek frekans uyarılması için yapılandırılmış ev yapımı kontrol yazılımı kullanıcı arayüzü . Seçilen parametreler kırmızı daire içerisine alınmış. B) Kullanıcı arayüzü, ev yapımı kontrol yazılımı patlama tek frekanslı stimülasyon için yapılandırılmış. C) Doğrusal süpürme uyarılması için yapılandırılmış ev yapımı kontrol yazılımı kullanıcı arayüzü. D) çok stimülasyon için yapılandırılmış ev yapımı kontrol yazılımı Kullanıcı arabirimi. <img src="/files/ftp_upload/2965/2965fig4.jpg" alt="Şekil 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 4"> Şekil 4 tabanı (yeşil) ve ProAnalyst yazılım "Özellik izleme" fonksiyonunu kullanarak, sırasıyla hücre, tepe (kırmızı) seçilen iki nokta bir OHC Tek kare . Hücrenin altında eğri, elektrik stimülasyonu ile ilişkili seçilen nokta arasındaki mesafe periyodik olarak değişiklikler gösterir. Hareketli dikey çubuk farklı çerçeveler bireysel analizi için seçilebilir. <img src="/files/ftp_upload/2965/2965fig5.jpg" alt="Şekil 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 5"> Şekil 5 ProAnalyst "Kontur İzleme" fonksiyonu hücre kenar otomatik olarak algılar ve optik bölümün alanı ölçmek. <img src="/files/ftp_upload/2965/2965fig6.jpg" alt="Şekil 6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 6"> Şekil 6 polystyrene küreler (üst) ve mikroküreler bireysel (alt) seçilen beş ile aynı görüntü ile dekore edilmiş, yalıtılmış bir OHC) Yakalanan görüntü. Farklı bir renk, her Microsphere atandı ve değiştirmeler, tek tek ve otomatik olarak kare kare takip çerçeve olabilir, analiz ve karşılaştırılmıştır. B) istenilen uzunlukta Grupları mikroküreler hücre kenarlarında bulunan polistiren seçerek tanımlanan olabilir ve bu kesimleri uzunluğu değişikliklerin yanı sıra başkalarına bir segment saygı yönde değişiklik (hücre bükme) tarafından otomatik olarak çerçeve değerlendirilebilir görüntü analiz yazılımları ile çerçevesi. Movie 1 kobay OHCs izolasyonu <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/2965/2965_Movie1_web.mov">video izlemek için buraya tıklayın</a> Film 2. Tipik electromotility ve bükme tepkiler gösteren EAEF OHCs paralel ve dik <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/2965/2965_Movie2_web.mov">video izlemek için buraya tıklayın</a>

<ol><li>Frolenkov, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+insights+into+the+morphogenesis+of+inner+ear+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetic insights into the morphogenesis of inner ear hair cells.</a> Nat Rev Genet. 5, 489-498 (2004).</li>
<li>Ashmore, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+outer+hair+cell+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Cochlear outer hair cell motility.</a> Physiol Rev. 88, 173-210 (2008).</li>
<li>Dallos, P., Fakler, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prestin%2C+a+new+type+of+motor+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Rev.+Mol.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Prestin, a new type of motor protein.</a> Nature Rev. Mol. Cell Biol. 3, 104-111 (2002).</li>
<li>Frolenkov, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+outer+hair+cell+bending+in+an+external+electrical+field%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Cochlear outer hair cell bending in an external electrical field.</a> Biophys. J. 73, 1665-1672 (1997).</li>
<li>Matsumoto, N., Kalinec, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extraction+of+Prestin-Dependent+and+Prestin-Independent+Components+from+Complex+Motile+Responses+in+Guinea+Pig+Outer+Hair+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Extraction of Prestin-Dependent and Prestin-Independent Components from Complex Motile Responses in Guinea Pig Outer Hair Cells.</a> Biophys J. 89, 4343-4351 (2005).</li>
<li>Matsumoto, N., Kalinec, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prestin-dependent+and+prestin-independent+motility+of+guinea+pig+outer+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Prestin-dependent and prestin-independent motility of guinea pig outer hair cells.</a> Hear Res. 208, 1-12 (2005).</li>
<li>Ashmore, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+remarkable+cochlear+amplifier%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">The remarkable cochlear amplifier.</a> Hear Res. 266, 1-17 (2010).</li>
<li>Kitani, R., Kakehata, S., Kalinec, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motile+responses+of+cochlear+outer+hair+cells+stimulated+with+an+alternating+electrical+field%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+Research%22%5BJournal%5D)">Motile responses of cochlear outer hair cells stimulated with an alternating electrical field.</a> Hearing Research. , (2011).</li>
<li>Dallos, P., Evans, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-frequency+outer+hair+cell+motility%3A+corrections+and+addendum%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">High-frequency outer hair cell motility: corrections and addendum.</a> Science. 268, 1420-1421 (1995).</li>
<li>Frank, G., Hemmert, W., Gummer, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limiting+dynamics+of+high-frequency+electromechanical+transduction+in+outer+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Limiting dynamics of high-frequency electromechanical transduction in outer hair cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 96, 4420-4425 (1999).</li>
<li>Santos-Sacchi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+frequency+limit+and+phase+of+outer+hair+cell+motility%3A+effects+of+the+membrane+filter%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">On the frequency limit and phase of outer hair cell motility: effects of the membrane filter.</a> J. Neurosci. 12, 1906-1916 (1992).</li>
<li>Inoué, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aInou%C3%A9%2C+S+%22Video+Microscopy%22">Video Microscopy</a>. , Plenum Press. New York. (1986).</li>
</ol>

Burada sunulan deneysel yöntem için herhangi bir sınırlama olmaksızın hücre hareketi kHz aralığında OHC hareketli tepkileri tahmin sağlar. Farklı stimülasyon protokolleri, ek belirteçleri (mikroküreler), elektrik alanı ile ilgili hücre yönünü iyi değişiklikleri gibi, daha önce ulaşılmaz bir detay seviyesi ile mümkün OHC hareketlilik yeni yönlerini araştırmak yapmak. Diğer yöntemler fotodiyotlar 9 veya lazer Doppler vibrometry 10 kullanarak, örneğin, hücrenin konumu sıkı bir kontrol gerektirir. Bura...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktifin Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> Leibovitz L-15 </td><td> Gibco </td><td> 21083 </td><td></td></tr><tr><td> Kollajenaz (Tip 4) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> C5138 </td><td> L-15 içinde 1mg/ml </td></tr></tbody></table>

harici alternatif elektrik alan uyarılma ve görüntü analizi yüksek hızlı bir kombinasyonu ile dış saç hücre motilite incelenmesi

Investigating Outer Hair Cell Motility with a Combination of External Alternating Electrical Field Stimulation and High-speed Image Analysis

OHCs Corti, memelilerin iç kulak içindeki işitme organı Organ bulunan silindirik sensorimotor hücreleri vardır. &quot;Kıl hücreleri&quot; adı stereocilia, 1 ses enerjisi algılama ve iletilmesi için kritik bir unsur kendi karakteristik apikal paket türemiştir. OHCs değiştirmek mümkün şekil uzatmak, kısaltmak ve viraj, elektrik, mekanik ve kimyasal stimülasyon yanıt, bir motor yanıt koklear akustik sinyal amplifikasyon 2 için çok önemli kabul. I) electromotility aka hızlı motilite, yoğun OHC plazma zarı paketlenmiş motor proteinlerin Elektrikle çalışan yapı değişiklikleri türetilen mikrosaniye aralığında uzunluğu ve ii) yavaş motilite, şekil değişiklikleri: OHC stimülasyon iki farklı hareketli yanıtları indükler saniye milisaniye sitoskeletal reorganizasyon 2, 3 içeren değişir. OHC bükme lateral plazma zarı, ya da bu motor protein (örneğin, bir elektrik alanı dik hücrelerin uzun ekseni) 4 asimetrik elektrik stimülasyonu motor proteinlerin asimetrik bir dağılım ya electromotility ile ilişkili ve sonucudur . Mekanik ve kimyasal uyaranlara hücre ve / veya çevreleri iyonik koşullarında değişiklikler de plazma zarı gömülü motor proteinleri 5, 6 uyarabilir olsa bile, aslında yavaş hareketli tepkileri neden olur. OHC hareketli yanıtları koklear amplifikatör önemli bir bileşeni olduğundan, akustik frekansları insanlarda 20 Hz - 20 kHz (kabaca) bu hareketli yanıtları kalitatif ve kantitatif analiz, araştırma 7 işitme alanında çok önemli bir konudur. Yüksek hızda videocameras, LED tabanlı aydınlatma sistemleri ve gelişmiş görüntü analizi yazılımı birleştirerek yeni bir görüntüleme teknolojisi gelişimi, şimdi harici bir alternatif elektrik alanı (EAEF) izole OHCs hareketli yanıt güvenilir nitel ve nicel çalışmalar gerçekleştirmek için yeteneği sağlar 8. Bu önceki yaklaşımlar 9-11 sınırlamaları en circumvents basit ve non-invaziv bir tekniktir . Ayrıca, LED tabanlı aydınlatma sistemi, numuneler üzerinde önemsiz termal etkileri ile aşırı parlaklık sağlar, çünkü video mikroskopi, optik çözünürlük, geleneksel ışık mikroskobu teknikleri 12 ile daha en az 10 kat daha yüksek. Örneğin, deney düzeneği Burada anlatılan, yaklaşık 20 nm hücre uzunluğunda değişiklikler ile rutin ve güvenilir bir şekilde 10 kHz frekansları tespit ve bu kararın daha düşük frekanslarda daha iyi olabilir. Biz bu deneysel yaklaşım OHC motilite altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları anlayışımız uzatmak için yardımcı olacağına eminiz.

Electromotility, yavaş motilite ve eğilme gibi dış tüy hücresi (OHC) hareketli yanıtları, araştırmak için güvenilir bir yöntem açıklanmıştır. OHC motilite harici bir alternatif elektrik alan stimülasyonu ile ve yöntemi, yüksek hızlı görüntü kaydı, LED tabanlı aydınlatma, ve son nesil görüntü analiz yazılımı yararlanır.

Harici Alternatif Elektrik Alan Uyarılma ve Görüntü Analizi Yüksek hızlı bir kombinasyonu ile Dış Saç Hücre Motilite incelenmesi

Dış tüy hücreleri (DTH'ler), memeli iç kulağındaki işitme organı olan Corti organında yer alan silindirik sensörimotor hücrelerdir. "Tüy hücreleri" ismi ...'den gelmektedir.

Bu prosedürün genel amacı; elektromotilite, yavaş motilite ve akustik frekanslarda bükülme dahil olmak üzere dış tüy hücresi (OHC) motil yanıtlarını incelemek için güvenilir bir yöntem sunmaktır. Bu işlem, öncelikle Gine domuzları, fareler veya diğer memeli hayvanlardan temporal kemiklerin hasat edilmesi ve kokleayı açığa çıkarmak için bullanın açılmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adımda koklea Lebovits L 15 içerisine daldırılır; kemik kabuğun apikal bölgesi, spiral ligament ve stria vascaya çıkarılır ve Corti organı uzaklaştırılır.Cort organının 1 mg/mL kollajenaz içinde beş dakika inkübe edilmesinin ardından, organ 50 µL'lik bir Hamilton şırıngası kullanılarak kayıt haznesine aktarılır ve hücreler, iğne üzerinden geri akış yaptırılarak ayrıştırılır. Daha sonra kayıt haznesi, dışsal bir alternatif elektrik alanı ile hücre stimülasyonu ve izole dış tüy hücrelerinin motil yanıtlarının yüksek hızlı bir kamera ile video kaydı için mikroskoba taşınır. Son olarak; dış tüy hücreleri, elektromotilite, yavaş motilite ve akustik frekanslardaki bükülme, bilgisayar destekli görüntü analizi ile değerlendirilebilir.Bu prosedüre, Guinea pigleri, fareler veya diğer memeli hayvan modellerinden tem

investigating-outer-hair-cell-motility-with-combination-external

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Memeli koklea iç saç hücresi şerit sinaps işitsel sinir lifi dendritler Tüm hücre yama klemp kayıtları.

Koklear İç Saç Hücreleri Ulaşın Afferent Dendritler postsinaptik Kayıtlar: Şerit Synapse Multivesicular Yayın İzleme

Bu video, bir fare kulak kepçesinin kıl foliküllerinde mekanik olarak uyarılmış afferent çıktı ve sinir terminali etiketlemesinin birleşik kaydını göstermektedir. Bir floresan membran boyasına maruz kalmadan önce ve sonra saç folikülü sinir terminallerinin mekanik stimülasyonu, üretilen aksiyon potansiyellerinin elektrofizyoloji kaydı ve saç foliküllerindeki sinir terminali etiketlemesinin görselleştirilmesi ile ilgili adımları ana hatlarıyla belirtir.

Fare kılı foliküllerinde mekanik olarak uyarılmış afferent çıktının ve sinir terminali etiketlemesinin birleşik kaydı

Kaynak: Lukasz, D., et al. Larva Zebra Balıklarında Lateral Çizgi Tüy Hücrelerinin İn Vivo Kalsiyum Görüntülemesi. J. Vis. Uzm. (2018)Bu video, felçli bir transgenik zebra balığı larvasının lateral çizgi saç hücrelerindeki kalsiyum akışının konfokal mikroskop kullanılarak canlı olarak görüntülenmesini göstermektedir. Saç demetlerinin sıvı darbeleri yoluyla mekanik olarak uyarılması, floresan göstergeleri kullanılarak gerçek zamanlı olarak görselleştirilen mekanotransdüksiyon kanalları ve voltaj...

Larva Zebra Balıklarının Lateral Çizgi Tüy Hücrelerinde Kalsiyum Dinamiğinin Görüntülenmesi

Vestibüler saç hücre fonksiyonu analizi kafatası, petröz temporal kemiğin en zor kısmı içinde derin konumlarına göre karmaşıktır. En işlevsel saç hücre çalışmaları akut izole saç hücrelerinin kullandık. Burada elektrofizyolojik ve iki-fotonlu mikroskop çalışmaları için fare vestibüler epitelyum bir yarı sağlam hazırlanması açıklanmaktadır.

Elektrofizyoloji ve yüksek çözünürlüklü İki foton Mikroskopi için Fare Vestibüler Duyu epiteli bir İzole Yarı sağlam Hazırlık

Bu çalışmada, ayrıntılı bir ışık mikroskobik tekniği, ultrastrüktürel analiz için bir elektron mikroskobik yöntemle birlikte CPEC kirpiklerin ex vivo hareketinin gerçek zamanlı gözlemi ve analizi için optimize edilmiştir.

Koroid Pleksus Epitel Hücreleri Silier Hareketi Gözlem<em&gt; Ex Vivo</em

Fare kulağı derisi kıl foliküllerini innerve eden palisade uçlarının mızrak şeklinde terminallerinin mekanik stimülasyonuna bağlı afferent deşarjı kaydetmek için basit ve yeni bir teknik sunulmuştur.

Fare Saç Folikül hançer Endings de Mekanik Uyarılmış Afferent Çıkışı ve Sinir Terminali Etiketleme Kombine Kaydı

Burada, stiril piridinyum boyalarla boyama ve lekelenme sırasında fare kulağı derisi kıl foliküllerini innerve eden palisade uçlarının canlı mızrak şeklinde duyusal terminallerini görüntülemek için yeni bir hazırlığı açıklıyoruz.

Saç Folikül hançer Endings Yaşam Sinir Terminal Etiketleme Optik İzleme<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Fare Kulak Cilt

Amerikan bullfrog en (Rana catesbeiana) sakkuluslar saç hücre fizyolojisinin doğrudan muayene izin verir. İşte diseksiyon ve biyofiziksel çalışmaları için Bullfrog en sacculus hazırlanması tarif edilmektedir. Biz onun unforced bir hareket Paketin kuvvet-deplasman ilişkisi hesaplanması ve ölçümü de dahil olmak üzere, bu saç hücrelerinden temsili deneyler göstermektedir.

Amerikan Bullfrog of sacculus (Saç Hücrelerinin fizyolojik hazırlanması<em&gt; Rana catesbeiana</em&gt;)

Bu iletişim kuralı İşitsel Beyin Sapı Davranım Odyometrisi postnatal fare pups üzerinden kaydetmek için yöntemler açıklanır. Dış saç hücreleri fonksiyonel gelişimi incelemek için tüm hücreli yama kelepçe dış saç hücreleri izole kayıt deneysel işlemin adım adım açıklanmıştır.

İşitsel Beyin Sapı Davranım Odyometrisi ve dış saç hücre bütün hücreli yama kelepçe kayıt Doğum sonrası sıçanlarda

Zebra balığı optik netlik, hızlı harici diller, dahil olmak üzere birçok değerli özellikleri ve işitme ve denge için belirli önemini, dışarıdan duyu saç hücreleri bulunan bir modeli sistemidir. Bu makalede nasıl transgenik zebra balığı özetlenmektedir saç hücreli mechanosensation ve presynaptic fonksiyonu toto tahlil için kullanılabilir.

Larva zebra balığı sonradan içini kaplamak saç hücrelerinin vivo kalsiyum görüntüleme

Burada, canlı işitsel saç hücrelerindeki stereosilia demetlerinin nano ölçekli görüntülenmesini sağlayan temassız tarama probu tekniği olan Zıplayan Prob İyon İletkenliği Mikroskopisi (HPICM) için bir protokol sunuyoruz.

Canlı Memeli İşitsel Saç Hücrelerinde Nano ölçekli Çözünürlüğe Sahip Stereosilia Bundle Görüntüleme

Öğrenin dış saç hücresi motilitesini incelemek için harici alternatif elektrik alanı uyarılması ve yüksek hızlı görüntü analizi yöntemini. Bu teknik işitme mekanizmalarını anlamak için güvenilir bir yaklaşım sunar.

Harici Alternatif Elektrik Alan Uyarılma ve Görüntü Analizi Yüksek hızlı bir kombinasyonu ile Dış Saç Hücre Motilite incelenmesi (Video) | JoVE Journal

Harici Alternatif Elektrik Alan Uyarılma ve Görüntü Analizi Yüksek hızlı bir kombinasyonu ile Dış Saç Hücre Motilite incelenmesi

Daha fazla video keşfet