Tanı Otopsi ve Sıçanlar ve Fareler Seçilmiş Doku ve Örnek Toplama

Bu prosedürün genel amacı, temel bir kemirgen nekropsisi yapmaktır. Bu, önce hayvanla ilgili temel bilgilerin kaydedilmesiyle gerçekleştirilir. İşlemin ikinci adımı iç organları incelemektir.

Üçüncü adım, organlar veya mezenterik lenf düğümleri gibi örneklerin toplanmasıdır. Sonuçta, bir hayvanın sağlık durumu histopatoloji veya diğer tekniklerle belirlenebilir. Genel olarak, nekropsi yapmaya yeni başlayan kişiler, kemirgen anatomileri iş başında öğrenildiği için mücadele edeceklerdir.

Bu yöntemler, bir araştırma kolonisindeki hayvanların sağlığı ile ilgili temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniklerin görsel olarak gösterilmesi önemlidir, çünkü çeşitli dokuların yerlerini öğrenmek ve anormal dokudan normal olanı nasıl ayırt edeceğinizi öğrenmek zaman alır. Hayvana ötenazi yapmadan önce, geçmişi hakkında bilgi toplayın ve fiziksel durumu, davranışı, cinsiyeti, yaşı, kilosu, türü vb. gibi mevcut özelliklerini kaydedin.

Bu kayıt, hayvana ötenazi yapmadan önce dokuları inceleyecek olan kişi için hayati bir yaştır. Uygun kişisel koruyucu ekipmanın kullanıldığından emin olun. Bir diseksiyon, tahta forseps, makas, kaplar için etiketler, fiksatif, ortam ve toplama kapları hazırlayın.

Hayvana ötenazi uyguladıktan sonra, vücut durumunu değerlendirin, deri ve tüy anormallikleri, zayıflama ve dehidrasyon olup olmadığını kontrol edin. Ayrıca hayvan üzerinde yapay manipülasyonlar, implantlar veya cerrahi yara izi olduğuna dair kanıt arayın. Daha sonra, bir diseksiyon mikroskobu kullanarak, tüm dış delikleri ayrıntılı olarak inceleyin.

Bunlara kulaklar, gözler, burun, ağız, anüs ve cinsel organlar dahildir. Şimdi, hayvanı diseksiyon tahtasının üzerine sırt üstü yatırın, derisini forseps ile kaldırın ve cildi anüsten çeneye kadar kesmek için makas kullanın. Daha sonra, cildi yanlara yansıtın ve karın duvarını ve göğüs kafesini kesin.

Göğüs kafesinin her iki yanında yanlamasına iki kesi yaparak torasik iç organları ortaya çıkarın. Diyaframı kesin. Daha sonra göğüs kafesinin üst kısmını keserek göğüs kafesini çıkarın.

Şimdi, açıkta kalan göğüs ve karın organlarını inceleyin. Herhangi bir renk değişikliğini, olağandışı kokuları, boyutu, farklılıkları ve eksik veya çıkık organları bilin. Organ yüzeylerinin kıvamını inceleyin ve herhangi bir doku kütlesi veya sıvı dolu cepleri not edin.

Ayrıca, her iki boşlukta da sıvı varlığına dikkat edin. Gastrointestinal sistem ile muayeneye devam edin. Mezenteri genişlemiş lenf düğümleri veya doku kitleleri açısından inceleyin.

Gastrointestinal sistemin içeriğini tanımlayın ve kalınlaşmış duvarlar, kitleler veya kanama olup olmadığını dikkatlice kontrol edin. Böbreklerin içini incelemek için, sol böbreğin uzunlamasına bir bölümünü ve sağ böbreğin bir kesitini orta hattın merkezinden çıkarmak için bir bıçak kullanın. Parankimi herhangi bir anormallik açısından kontrol edin.

Şimdi erkeklerde ürogenital sistemi inceleyin. Kadınlarda seminal vezikülleri, testisleri, epididimiği, üreterleri ve perüsal bezleri tanımlayın. Rahimi, yumurtalıkları ve üreterleri tanımlayın.

Ürogenital sistemi tıkanıklıklar, sıvı cepleri, kanama veya diğer anormallikler açısından inceleyin. Bu muayeneleri tamamladıktan sonra, daha fazla inceleme için hedef organları izole edin ve eksize edin. Tipik olarak, kalp, karaciğer, böbrekler ve dalak eksize edilirken toplanır.

Her organı bir fiksatife batırın veya yeterli fiksasyon elde etmek için dondurma veya immünohistokimya gibi bu dokuları gerektiren bir protokolün ilk adımlarını izleyin. Genel olarak, dokular bir hacim dokuya 20 hacim fiksatif oranında %10 NBF gibi bir koruyucu maddeye batırılır. Sıçanlarla çalışırken, nazal aspirattan önce bronşiyal aspiratı toplayın.

Deri altı dokulardaki cildi servikal bölgeden uzağa yansıtarak başlayın, böylece tükürük bezlerini ve servikal kas sistemini açığa çıkarın. Daha sonra trakeayı ortaya çıkarmak için bu dokuları çıkarın. Trakeaya üç milimetrelik bir kesi yapın ve üç ayda bir yönlendirilen trakeal lümene bir mililitre örnekleme sıvısı yüklü bir pipet yerleştirin.

Örnekleme sıvısını trakeadan ve akciğerlere üç kez yavaşça akıtın. Ardından numune alma sıvısını geri çekin ve pipeti trakeadan çıkarın. Sıvının tamamı pipete geri dönmez.

Bu nedenle, daha fazla sıvıya ihtiyaç duyulursa işlemi tekrarlayın. Farelerde test etmek için. Nazal aspirat veya bronşiyal aspirat örneği almak için sterilize edilmiş makas kullanarak nazal faringeal ATU'ya erişin.

Temporal mandibular eklemi kesin ve mandibulayı maksilladan uzağa yansıtın, nazal aspiratı toplamak için nazal faringeal atu'yu açığa çıkarın. Farenin nazal faringeal atü'süne veya farenin trakeal lümenine bir mililitre örnekleme sıvısı yüklü bir pipet yerleştirin. Pipet yönlendirilmeli ve içeri itilmelidir.

Böylece uç burun damağına temas eder. Bir kez orada, örnekleme sıvısını yavaşça enjekte edin. Sıvı burun boşluğuna girdiğinde, burun deliğinde menisküs oluşturacak ve yarı saydam ağız damaktan da görülebilmelidir.

Bununla birlikte, ağızdan sıvı çıkarsa, pipeti yeniden yönlendirin. Tamamen enjekte edildikten sonra, örnekleme sıvısını burun boşluğundan pipete çekin ve ardından pipeti çıkarın. Trakeayı forseps ile kavrayarak başlayın ve forsepsin hemen üzerinden kesin.

Daha sonra, trakeayı yavaşça yukarı doğru çekin ve tüm torasik doku seti eksize edilene kadar doku bağlantılarını kesin. Şimdi, akciğerleri çalışma yüzeyine düz bir şekilde yatırın ve trakeanın etrafına gevşek bir şekilde bir parça sütür veya ip bağlayın. Düğümü sıkmayın, aksi takdirde iğneyi soluk borusuna geçiremezsiniz.

Şimdi, bir şırıngayı sabitleyici ile doldurun ve trakeayı iğneye sabitlerken iğneyi trakeanın açıklığına sokun. Forseps ile akciğerleri tamamen şişirilene kadar yavaşça sabitleyici ile doldurun. Fiksatif hacmi, hayvanın yaşına, suşuna ve sağlığına göre değişecektir.

Az şişirilmiş dokular düz görünecekse, aşırı şişirilmişse, dolduktan sonra dokudan köpüklü sıvı sızacaktır, fiksatifin akciğerlerden geri akışını önlemek için trakeayı çevreleyen dikiş materyalini veya ipi sıkın. Ardından şişirilmiş akciğerleri fiksatif içine yerleştirin. Karkası ventral yaslanmış temiz bir diseksiyon tahtasına yerleştirin ve baldırın üzerindeki cildi ve kası çıkarmak için makas ve forseps kullanın.

Sonra küçük bir makas kullanarak karkasın başını kesin. Alt bıçağı foramen magnumun içine yerleştirin ve yukarı doğru bir hareketle baldırın orta hattını kesin. Şimdi, baldırı çekerek açarak beyni forseps ile açığa çıkarın.

Patolog kafatasının içindeyken beynin bölümlerini kesmeyi tercih ederse, beyni açıkta kalan kafatasını hemen% 10 NBF'ye yerleştirin. Aksi takdirde, kafayı burnun etrafından forseps veya parmaklarla kavrayın ve kafatasını nazikçe ters çevirin, böylece yerçekimi dokunun kafatasından düşmesine yardımcı olur. Dikkatlice. Koku alma loblarından başlayarak beynin dış kenarı boyunca eğri forsepsleri kaydırın.

Forsepsleri kafatası boyunca beyinciklere doğru kaydırmaya devam ederken, aynı forsepslerle sinirleri hafifçe sıkıştırın. Beyin yeri fiksatif hale getirdiğinde, önce mezenterik lenf düğümlerini bulmak için, bağırsağın büyük iletişim şeklindeki secumunu bulun. Mezenterik lenf düğümleri, çekuma bitişik mezenterdeki sarı oval veya küresel doku topaklarıdır.

Genellikle çevredeki mezenter ve yağdan biraz daha kalın ve daha sıkı bir dokuya sahiptirler. Bir diseksiyon kapsamı ilk başta dokuları ayırt etmek için yararlı olabilir, ancak deneyimle gerekli olmayacaktır. Forseps ve makas kullanarak mezenterik lenf düğümlerini izole edin, ardından kültür, PCR veya histopatoloji için kullanılacak bir saklama tüpüne aktarın.

Protokolü tamamladıktan sonra, ötenazide objektif ve subjektif durumun yazılı bir raporu olan bir patolog veya bilim adamı için aşağıdakiler mevcuttur. Fiksasyondan önce dokuların objektif bir tanımı, fiksatif olarak tüm ana abdominal ve torasik organlar, beyin ve mezenterik lenf nodları ve nazal ve bronşiyal aspirat örnekleri. Bir kez ustalaştıktan sonra, kısaltılmış bir nekropsi 30 dakikadan az sürebilir.

Bu prosedürü gerçekleştirirken, hayvanın ve dokularının durumuna ilişkin gözlemlerinizi kaydetmeyi unutmamak önemlidir. Bu videoyu izledikten sonra, perfüze akciğerlerin, mezenterik lenf düğümlerinin ve beynin toplanması da dahil olmak üzere tam bir kemirgen nekropsisinin nasıl gerçekleştirileceğini iyi anlamalısınız.