Antikorla İşlevselleştirilmiş SERRS Nanoprob Tabanlı Görüntüleme: Metastatik Over Kanserini İn Vivo Olarak Tespit Etmek İçin Oldukça Hassas Bir Raman Görüntüleme Tekniği

Yüzeyde Geliştirilmiş Rezonans Raman Saçılması veya SERRS tekniği, gelen ışıkla etkileşime girmek ve esnek olmayan ışık saçılımına neden olmak için bir Raman raportör boyası taşıyan analit moleküllerini kullanır.

İki tip nanoprob içeren bir enjeksiyon karışımı ile başlayın - belirgin bir muhabir boyası taşıyan spesifik anti-reseptör antikorları ile etiketlenmiş hedefli nanoproblar ve farklı bir raportör boyaya sahip hedeflenmemiş kontrol nanoprobları. Bu süspansiyonu, metastaz yapmış yumurtalık kanseri taşıyan bir dişi farenin periton boşluğuna enjekte edin. Nanoprobların periton boşluğu içinde dağılması için yeterli zaman tanıyın.

Hedeflenen anti-reseptör antikoru işlevselleştirilmiş nanoproblar, yumurtalık kanseri hücrelerinde aşırı eksprese edilen spesifik reseptörlerine bağlanırken, hedeflenmemiş nanoproblar spesifik olmayan bir şekilde viseral yüzeye yapışır.

Fareyi ötenazi yapın ve sırtüstü pozisyonda bir görüntüleme platformuna sabitleyin. Karnını cerrahi olarak kesin ve periton boşluğunu ortaya çıkarmak için bağırsakları çıkarın. Fareyi bir Raman mikrospektrofotometresi altında görüntüleyin.

Lazer ışığı ile ışınlamada, her iki nanoprob türü de gelen ışığın farklı şekilde dağılmasına neden olur ve her biri benzersiz spektral imzalar oluşturur. Kanser hücrelerini viseral arka plandan ayırt etmek için nanoprobların nispi bolluğunu belirlemek için spektrumları işleyin.

Nanoprob enjeksiyonu için, her iki nanoprob aromasını da döndürün ve peletleri 600 pikomolar konsantrasyonda taze MES tamponunda yeniden süspanse edin. Nanopartikülleri karıştırın ve elde edilen çözeltinin 1 mililitresini, fare başına 26 gauge iğne ile donatılmış 1 mililitrelik bir şırıngaya yükleyin ve intraperitoneal olarak tüm hacmi her farenin karnına enjekte edin. Ardından, nanopartikülleri periton boşluğu boyunca dağıtmak için karına hafifçe masaj yapın.

En az 25 dakika sonra, ötenazi enjekte edilmiş bir hayvanın uzuvlarını cerrahi bir platforma sabitleyin ve peritonu ortaya çıkarmak için cildi çıkarmak için tırtıklı forseps ve diseksiyon makası kullanın. Peritonu kesin. Periton fleplerini platforma takın ve periton boşluğunun içini en az 60 mililitre PBS ile yıkayın. Ardından, platformu motorlu bir aşamada dik optik konfigürasyona sahip bir Raman mikrospektrofotometresine aktarın ve uygun görüntüleme parametreleri altında karnı görüntüleyin.

Raman taraması için odak düzleminin iç organların çoğunun yüzeyinde olması çok önemlidir. Organlar düzlem dışındaysa, elde edilen sinyal yararlı olmayacaktır.

• Surface-Enhanced Resonance Raman Scattering (SERRS) - Technics to cause inelastic light scattering using dye.
• Targeted Nanoprobes - Tagged with antibodies to detect specific receptors.
• Non-targeted Nanoprobes - Adhere non-specifically to detect control samples.
• Raman Microspectrophotometer - Device used to generate unique spectral signatures.
• Spectral Signature - Unique light scattering pattern for distinguishing different materials.

• Introduce SERRS – Technique to analyze molecules via light scattering (e.g., SERRS).
• Explain Nanoprobes – Role of targeted and non-targeted nanoprobes in disease detection (e.g., ovarian cancer).
• Using Raman Microspectrophotometer – Imaging and analysis method (e.g., spectral signature).
• Connecting to Experiment – Approach to differentiate cancer cells via nanoprobes.

• [Question 1] What is SERRS and how does it use dyes?
• [Question 2] How do targeted and non-targeted nanoprobes work?
• [Question 3] How does a Raman microspectrophotometer generate spectral signatures?

• Practical Applications – Non-invasive cancer cell detection methodology (e.g., SERRS).
• Industry Impact – Advancement in cancer research and diagnostics (e.g., healthcare).
• Societal Importance – Enhancing early detection and treatment of diseases (e.g., ovarian cancer).
• Scientific Advancements – Contributions to photonic and biomedical research.