Omentumun Yumurtalık Kanseri Hücre Kolonizasyonunun Modellenmesi: Murin Omentum Eksplantlarında Floresan Etiketli Yumurtalık Kanseri Hücrelerinin Sütlü Nokta Kolonizasyonunu Oluşturmak İçin Ex Vivo Bir Yöntem

Periton boşluğu içinde yağ açısından zengin bir doku olan omentum, metastatik kanser hücrelerinin kolonize olması ve ikincil tümörler oluşturması için uygun bir mikro ortam sağlayan yağ depolarından oluşur. Bu kolonizasyonu ex vivo olarak incelemek için, bir kültür plakasının içine geçirgen bir membranöz hücre kültürü eki yerleştirerek başlayın.

Insert membranın iç bölgesine bir doku yapıştırıcısı sürün. Dokuyu hareketsiz hale getirmek için yapıştırıcının üzerine bir fare omental eksplant yerleştirin. Omentumun üzerine floresan etiketli yumurtalık kanseri hücrelerinin bir süspansiyonunu nazikçe tohumlayın.

Daha sonra, hücre büyümesini desteklemek ve istenen süre boyunca inkübe etmek için kuyu kenarlarını uygun bir ortamla doldurun. Omental doku, kan damarı ağlarının etrafına paketlenmiş bağışıklık hücresi kümeleri olan sütlü lekeler adı verilen özel yapılar içerir. Bu bağışıklık hücreleri, kanser hücrelerini çeken ve implantasyonlarını destekleyen bazı kimyasal faktörler salgılar. Kolonize kanser hücreleri, metastatik koşulları simüle ederek çoğalır.

Son olarak, harcanan medyayı atın. Omental doku içindeki floresan kanser hücresi kolonilerini değerlendirmek için bir floresan mikroskobu kullanarak kültürü gözlemleyin.

Floresan etiketli hücreleri büyütün ve hazırlayın ve mililitre başına 2 milyon hücre konsantrasyonunda yeniden süspanse edin. Kültür ekinin zarına yaklaşık 6 mikrolitre doku yapıştırıcısı uygulayın ve kurumaya bırakın. Ardından, membranları laminer bir başlık altında havayla kurutmadan önce fazla yapıştırıcıyı çıkarmak için membranı iki kez steril suyla yıkayın.

Omenta'yı dikkatlice eksize edin ve steril forseps kullanarak yapışkan kaplı membrana tutturun. Dokunun bir dakika boyunca zara yapışmasına izin verdikten sonra, her kültür ekindeki her omentumun üzerine 500 mikrolitre hücre süspansiyonu ekleyin.

Ardından, transwell odasının etrafındaki alanı 2,5 mililitre DME/F-12 ortamı ile doldurun. Omenta'yı hücre süspansiyonu ile %5 CO2 ortamında 37 santigrat derecede altı saat inkübe edin. Omenta'yı dikkatlice çıkarın ve yaklaşık 10 mililitre PBS ile yıkayın. Son olarak, uygun bir floresan görüntüleme sistemi kullanarak floresan kanser hücresi odaklarını görselleştirin.

• Omentum – An adipose-rich tissue within the peritoneal cavity.
• Omental Tissue – Tissue providing a microenvironment for cancer cells.
• Ovarian Cancer – Cancer that seeds and proliferates on the omentum.
• Milky Spots – Structures that attract and support cancer cell implantation.
• Omental Metastasis – Secondary tumor colonization within the omental tissue.

• Omentum is a fat-rich depot providing a home for cancer cells (e.g., omental tissue).
• The omental tissue contains specialized structures known as milky spots (e.g., theory).
• Milky spots secrete chemicals, attracting and supporting cancer cells (e.g., processes).
• The seeded cancer cells proliferate, simulating metastatic conditions (e.g., experiment).

• What is the role of omentum and milky spots in ovarian cancer metastasis?
• What causes proliferation of cancer cells within the omental tissue?
• How do milky spots support cancer cell implantation?

• This research can contribute to new treatment strategies for ovarian cancer (e.g., technology).
• The findings can impact healthcare by improving understanding of metastasis (e.g., healthcare).
• The research could lead to improved quality of life for patients with ovarian cancer (e.g., sustainability).
• The research paves the way for advancement in the treatment of metastatic cancers (e.g., innovations).