Tavuk Korioallantoik Membran Tabanlı Kanser Modellemesi: Kanser Hücresi Tümörigenezi ve Metastazı Çalışmak İçin Bir In Ovo Model

Tavuk koryoallantoik zarı veya CAM, tavuklar gibi bazı omurgalıların yumurtalarında bulunan oldukça vaskülarize bir zardır. Bu ekstra embriyonik zar, vasküler olmayan bir kabuk zarını kaplar ve embriyo ile çevre arasında gaz halindeki oksijen ve karbondioksit değişim yeri olarak işlev görür.

Bir CAM kanser modeli oluşturmak için, dallanan vaskülatürünü açığa çıkaran kısmen açılmış bir kabuğa sahip, tamamen gelişmiş bir CAM taşıyan canlı, döllenmiş bir tavuk yumurtası ile başlayın. CAM'ın kabuk zarından ayrıldığını onaylayın.

Bir kan damarı dal noktasının üzerine steril bir yapışmaz halka yerleştirin. Bir cam çubuk kullanarak, dış epitel tabakasını kazımak ve vaskülatürü taşıyan alttaki mezodermal tabakayı ortaya çıkarmak için halkanın içindeki zarı hafifçe ovalayın. Uygun bir hücre dışı matris ile karıştırılmış soğutulmuş bir kanser hücresi süspansiyonunu halkaya pipetleyin. Halka hücresel yayılmayı kısıtlar.

İçindeki hücreleri sabitlemek için matrisin katılaşmasına izin verin. Yumurta kabuğu ağzını kapatın ve yumurtayı uygun koşullarda kuluçkaya yatırın. Mezodermal tabaka içindeki yoğun damar sistemi, kanser hücrelerine oksijen ve temel besinleri sağlar, böylece büyümeleri ve geni