JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:55 dk. • April 30th, 2023
Kanser hücrelerinin 3D organoid kültürleri, insan kanserlerinin birçok patofizyolojik özelliğini özetlemektedir. Bu nedenle, bu in vitro kültürler kanser araştırmaları için mükemmel bir model oluşturur.
Bu organoidleri işlemek için, uygun bir bazal membran matrisinde büyütülen önceden oluşturulmuş 3D organoidlerin bir kültürüyle başlayın. İstenilen bir hücre geri kazanım ortamını ekleyin ve inkübe edin. Ortam, matris jelinin depolimerizasyonunu kolaylaştırır ve 3D organoidleri çözeltiye bırakır.
Organoidleri peletlemek için bu karışımı santrifüjleyin. Matris bileşenlerini içeren geri kazanım ortamı süpernatantta kalır. Süpernatanı atın. Ardından, organoid pelete paraformaldehit çözeltisi ekleyin. Kimyasal, organoid hücrelere girer ve amino asitlere bağlanarak protein çapraz bağlanmasına ve numune fiksasyonuna neden olur. Bu adım, herhangi bir aşağı akış histolojik uygulaması için hayati önem taşır.
Paraformaldehit içeren süpernatanı ayırmak ve çıkarmak için organoidleri peletleyin. Organoidlere ılık eritilmiş agaroz ekleyin. Peletlenmiş organoidleri sıvı agarozun içine ayırmak ve dağıtmak için bir iğne kullanın. Agarozun katılaşmasına ve organoidleri gömmesine izin verin. Aşağı akı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin