Mikromanipülasyon Kullanarak Tek Hücre Örneklemesi: Tek Hücreleri Kanser Hücresi Süspansiyonundan İzole Etme Tekniği

Tek hücreli örnekleme, aşağı akış analizi için kanser hücrelerinin bir süspansiyonundan tek bir canlı hücrenin izole edilmesini sağlar.

İzolasyona bir kanser hücresi süspansiyonu ile başlayın. Bu süspansiyonun istenen hacmini bir cam slayt üzerine aktarın. Parçacık hareketini azaltmak ve hücrelerin yerleşmesine izin vermek için slaytı bir süre rahatsız etmeden bırakın.

Şimdi, slaytı bir mikrokılcal uca bağlı bir mikromanipülatör ile donatılmış bir mikroskop altına aktarın. Bu yüksek hassasiyetli alet, numunedeki hücrelerle mikroskobik düzeyde fiziksel etkileşimi kolaylaştırır.

Mikrokılcal ucu tek bir hedef hücreye yaklaştırın. Emme uygulayarak, hedef hücreyi mikrokılcal damar içine toplayın. Şimdi, mikrokılcal damarı doğrudan istenen toplama tamponunu içeren bir tüpe aktarın.

Yakalanan tek hücreyi tampona bırakmak için mikrokılcal içeriği çıkarın. İzole edilmiş canlı tek hücreyi daha fazla analize kadar buz üzerinde saklayın.

Mikromanipülasyon için, 100 mikrolitre hücre süspansiyonunun tamamını bir cam slayt üzerine aktarın. Ardından, cam slaytı bir mikromanipülatör ile donatılmış bir mikroskoba yerleştirin ve hücrelerin 5 dakika oturmasına izin verin. Daha sonra, 0.2 mililitrelik