Kanser Hücrelerinin İntraprostat Enjeksiyonu: Ortotopik Prostat Kanseri Fare Modeli Oluşturmak için Kanser Hücreleri Verme Tekniği

İntra-prostat ortotopik tümör enjeksiyonu, prostat dokusu histotipine uyan tümör hücrelerini doğrudan alıcı hayvanın prostat bezine iletir.

Başlamak için, sırtüstü pozisyonda anestezi uygulanmış bir erkek fare hazırlayın. Orta hatta bir karın kesisi yapın ve karın boşluğunu ortaya çıkarmak için iç kas sistemini inceleyin. Ön prostat loblarından birini bulun. Bu prostat lobları, seminal veziküllerin daha küçük eğriliğine bağlanır ve idrar kesesine yakın uzanır.

Şimdi, istenen bazal membran matrisi ile karıştırılmış soğutulmuş bir prostat kanseri hücresi süspansiyonunu ön prostat lobunun uzun eksenine enjekte edin. Hücre süspansiyonunun tam olarak verildiğinden emin olun ve iğneyi nazikçe geri çekin. Matrisin katılaşmasına ve hücreleri içine gömmesine izin verin.

Daha sonra, prostat lobunu seminal vezikül ile birlikte karın boşluğuna geri yerleştirin. Cerrahi insizyonu dikin. Farenin iyileşmesine izin verin. Ön prostat lobundaki ortotopik tümörlerin büyümesini gözlemlemek için fareyi haftada bir kontrol edin.

Ayak parmağını çimdiklemeye yanıt verilmediğini onayladıktan sonra, farenin gözlerine merhem sürün ve hayvanın karnındaki tüm kürkü tıraş edin. Steril yapışmayan pedler ve ardından steril alkollü mendiller kullanarak açıkta kalan cildi üç tur cerrahi ovma ile sterilize edin. Cilt kuruduğunda, fareyi sırtüstü pozisyonda, doğrudan temiz bir cerrahi mikroskobun amacının altındaki bir ısıtma yastığının üzerine yerleştirin ve hayvanı, karın üzerinde küçük bir delik açılan steril bir örtü ile örtün.

Dış deride ve iç karın kaslarında, penis ve preputial bezlerden daha üst olan karın orta hattı boyunca 1 santimetrelik bir kesi yapın. Bilateral seminal veziküllerden birini ve tipik olarak arka, lateral ve mesanenin biraz üstünde olan bağlı ön prostat loblarını bulun. Bir asistandan Myc-CaP matrigel kanser hücresi solüsyonunu nazik pipetleme ile karıştırmasını ve 30 mikrolitre hücreyi 50 mikrolitrelik bir şırıngaya bağlı 28 gauge bir iğneye yavaşça aspire etmesini isteyin.

Daha sonra, Graefe doku forsepslerini kullanarak, vezikülü delmeden doku üzerinde gerginlik oluşturmak için bir seminal vezikülün ucunu nazikçe kaldırın ve iğnenin eğimini ön prostat lobunun uzun eksenine paralel olarak dikkatlice yerleştirin. Tüm hücre hacmini yavaşça loba enjekte edin, ardından sızıntıyı önlemek için iğneyi yavaşça geri çekin.

Başarılı bir enjeksiyon, iç prostat lobunun büyütülmesiyle ortaya çıkacaktır. Dikkatli ve istikrarlı bir şekilde, matrijelin lob içinde kısmen katılaşmasına izin vermek için seminal vezikülü ve enjekte edilen prostat lobunu farenin dışında yaklaşık 30 saniye tutun. Ortotopik olmayan tümör gelişimini önlemek için karın içine herhangi bir hücre çözeltisi sızıntısını toplamak için steril bir polyester uçlu aplikatör kullanın.

Doğru bir intra-prostat enjeksiyonu, ortotopik tümör gelişimi için kritik öneme sahiptir. Seminal vezikülün delinmemesi için ekstra özen gösterilmesi, kanser hücresi süspansiyonunun yavaşça enjekte edilmesi ve herhangi bir hücre sızıntısının toplanması bu işlemin başarısını artıracaktır.

Şimdi, seminal vezikülü ve enjekte edilen lobu, lob üzerine baskı yapmadan nazikçe karın bölgesine geri koyun ve dışsallaştırılmış dokuları değiştirin. 5-0 vicryl emilebilir ters kesici iğneli sütürler kullanılarak karın iç kas sistemi sürekli dikişlerle kapatılmalı, ardından 4-0 naylon monofilament emilmeyen ters kesici iğneli sütürler kullanılarak dış karın cildi kesintili dikişlerle kapatılmalıdır.

Ardından, ameliyat sonrası analjezi uygulayın ve fareyi, tam iyileşmeye kadar izleme ile bir ısıtma yastığının yarısına kadar yatak takımı olmayan bir kafese yerleştirin.

• Prostate Cancer Model - A lab representation to study the progression & treatment of prostate cancer.
• Intraprostatic Injection - Technique of injecting medication or solution directly into the prostate.
• Matrigel - A gelatinous protein matrix used in tumor cell research.
• Orthotopic Tumor Model - Study model wherein tumor cells are implanted in their original organ.
• Seminal Vesicles - Male reproductive glands located near the prostate, integral to the injection procedure.

• Introduce Prostate Cancer Model – Biological method to examine prostate cancer (e.g., intraprostatic injection).
• Key Concepts – Involve steps like shaving, sterilizing, incising and suturing (e.g., prostate biopsy procedure video).
• Underlying Mechanisms – Seminal vesicles and anterior prostate lobes are involved (e.g., prostate cancer real images).
• Connect to Experiment – Demonstrate how injections ensure successful tumor implantation within prostate.

• What is intraprostatic injection used for in a prostate cancer model?
• How is the matrigel cancer cell solution involved in the procedure?
• Why is careful handling of seminal vesicles and prostate lobes crucial in this experiment?

• Practical Applications – Used in surgical training and cancer treatment research (e.g., prostate cancer injection).
• Industry Impact – Benefits medical industries, particularly oncology and urology (e.g., injection for prostate cancer).
• Societal Importance – Advancement in prostate cancer treatment techniques (e.g., injection prostate).
• Link to Scientific Advancements – Continuous improvement of prostate cancer models for research.