Fonksiyonel Kemorezistans Karakterizasyonu: Klonojenik Test Kullanarak Kanser Hücrelerinde İlaç Direncini Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

Kanser hücrelerinde kemorezistansı değerlendirmek için, çok kuyucuklu bir plaka alarak başlayın. İstenen ilaca duyarlı prostat kanseri hücrelerinin birkaç oyuğa bir süspansiyonunu ve hücrelerin ilaca dirençli varyantının bir süspansiyonunu kalan oyuklara tohumlayın.

Hücrelerin kültür plakasına bağlanmasını kolaylaştırmak için kültürü inkübe edin. Her iki hücre tipini de seçilen ilaç çözeltisinin bir dizi artan dozu ile tedavi edin. İlaç molekülleri hassas hücrelere girer ve en düşük konsantrasyonlarında bile hücre ölümüne neden olur. Bununla birlikte, dirençli hücreler, ilaç moleküllerini özel ilaç akış pompaları yoluyla dışarı atar ve daha yüksek ilaç konsantrasyonlarına maruz kalmalarına rağmen hayatta kalmalarını sağlar.

Kalıntı ve ilaç çözeltisi içeren kullanılmış ortamı aspire edin. Taze ilaçsız büyüme ortamı ile takviye edin. Hayatta kalan ilaca dirençli hücrelerin çoğalmasına ve koloniler oluşturmasına izin vermek için kuluçkaya yatırın. Canlı hücre kolonilerini renklendirmek için uygun bir boyama solüsyonu ekleyin.

Fazla boyayı çıkarmak için kültürü yıkayın. Her kuyucuktaki renkli kolonilerin sayısını sayın. İlaca duyarlı hücreler içeren kuyucuklar çok az sayıda canlı kolon