JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 4:59 dk. • April 30th, 2023
Düşük yoğunluklu nötrofiller veya LDN'ler, gastrointestinal kanser gibi patolojik durumlar sırasında yüksek sayılarda bulunan farklı bir nötrofil alt popülasyonudur. LDN'ler hastaların periton boşluğu yıkamalarından veya lavaj sıvısından izole edilebilir.
İlk olarak, doku kalıntılarını gidermek için lavaj sıvısını filtreleyin. LDN'ler de dahil olmak üzere kan hücreleri içeren bir pelet elde etmek için süzüntüyü santrifüjleyin. Uygun bir tamponda yeniden süspanse edin. Bu süspansiyonu, LDN izolasyonu için en uygun olan uygun bir yoğunluk gradyan ortamının üzerine katmanlayın.
Farklı kan bileşenlerini nispi yoğunluklarına göre ayırmak için santrifüjleyin. Daha yoğun RBC'ler alt katmanı oluştururken, en az yoğun plazma fraksiyonu en üst katmanı oluşturur. Daha az yoğun LDN'ler, diğer mononükleer hücrelerle birlikte ara tabakayı işgal eder.
Ara katmanı, bir bloke edici reaktif içeren yeni bir tüpe aktarın. Reaktif bileşenleri, hedef olmayan tüm hücrelerin yüzeylerindeki spesifik olmayan bağlanma bölgelerini bloke eder ve sonraki etiketleme sırasında LDN için özgüllüğü arttırır.
LDN'lerde aşırı eksprese edilen spesifik bir hücre yüzeyi molekülünü hedefleyen antikor konjuge mikro boncukl
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin