JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:05 dk. • April 30th, 2023
Kanser gibi patolojik durumlar sırasında, aktive edilmiş nötrofiller, histonlar ve proteolitik enzimlerle ilişkili hücre dışı DNA liflerinden oluşan bir ağ olan nötrofil hücre dışı tuzakları veya NET'leri serbest bırakır. Bu yapılar kanser hücrelerini hapseder ve kanser metastazında kilit rol oynar.
NET'lerde sıkışan kanser hücrelerinin yapışma sonrası davranışını in vitro olarak incelemek için, önce düşük yoğunluklu nötrofilleri - bir nötrofil alt popülasyonu - hücre bağlanmasını kolaylaştıran polimer kaplı bir kültür kabında kültürleyin. Ağ benzeri NET'leri serbest bırakmak için nötrofilleri aktive etmek için kuluçkaya yatırın.
Daha sonra, özellikle NET'lerdeki DNA liflerini boyamak için zar geçirimsiz yeşil bir floresan nükleer boya ekleyin. Harcanan ortamı çıkarın. Nötrofil kültürüne bir kanser hücresi süspansiyonu ekleyin.
Kanser hücresi-NET etkileşimini kolaylaştırmak için kültürü kısa bir süre inkübe edin. NET'lerin DNA bileşeni, kanser hücrelerinin göçünü uyaran ve NET'lere yapışmalarına yardımcı olan kemotaktik bir faktör olarak işlev görür.
Harcanan ortamı çıkarın. Kültür kabından bağlanmamış kanser hücrelerini çıkarmak için kültürü uygun taze ortamla nazikçe durulayın. T
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin