JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 5:13 dk. • April 30th, 2023
İnsanlarda fundus, midenin en üst kısmıdır. Fundik epitel, sindirime yardımcı olan mide suyu salgılayan çok sayıda mide bezinden oluşur.
Mide fundik bezlerini izole etmek için, bir beherde insan fundik dokusu alarak başlayın. Behere uygun bir tampon ekleyin ve fundik dokuyu kuvvetlice yıkayın. Yıkama, kirletici kalıntıları ve kanı fundik dokudan uzaklaştırır.
Temiz dokuyu bir Petri plakasına aktarın. Steril gazlı bez kullanarak, koruyucu mukoza tabakasını silin, böylece alttaki epitel tabakası açığa çıkar. Forseps kullanarak, en üst epitel tabakasını dokudan kuvvetlice kazıyın.
Kazınmış epiteli başka bir Petri plakasına aktarın ve daha küçük parçalar halinde kıyın. Kıyılmış parçaları, kollajenaz enzimleri ile desteklenmiş bir tampon içeren bir şişeye ekleyin. Topaklanmayı önlemek için sürekli çalkalama ile istenen sıcaklıkta inkübe edin.
Kollajenaz, epitel tabakasında bulunan hücre dışı matriks proteinlerini sindirerek ayrışmış fundik bezleri süspansiyona bırakır. Ayrılmamış topakları çıkarmak için süspansiyonu yeni bir tüpe süzün.
Bezleri çökeltmek için glandüler filtratı buz üzerinde rahatsız etmeyin. Süpernatan içeren hücre kalıntılarını atın ve glandüler tortuyu yeni bir tampon
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin