JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:24 dk. • April 30th, 2023
Dil, tabakalı skuamöz epitel ve lamina propria adı verilen altta yatan yoğun bir bağ dokusu tabakasından oluşur. Epitel, mekanik strese karşı koruma sağlayan çok katmanlı skuamöz epitel hücrelerinden oluşur.
Epitel hücrelerini izole etmek için yeni hasat edilmiş bir fare dili ile başlayın. Daha küçük doku parçaları elde etmek için dili kıyın. Daha sonra, fragmanları kollajenaz, hyaluronidaz ve deoksiribonükleaz enzimleri içeren özelleştirilmiş bir sindirim kokteyli ile muamele edin.
Kollajenaz ve hyaluronidaz enzimleri, dokuyu bir arada tutan hücre dışı matrisi sindirir ve tek tek hücrelerin süspansiyona salınmasını teşvik eder. Deoksiribonükleaz, parçalanmış hücrelerden salınan herhangi bir serbest DNA'yı bozar.
Protein hidrolize edici enzimleri etkisiz hale getirmek için sindirilmiş numuneye serum içeren tampon ekleyin. Şimdi, sindirilmemiş doku parçalarını ve kalıntıları gidermek ve epitel hücrelerinin tek hücreli bir süspansiyonunu elde etmek için numuneyi hücre süzgeçlerinden süzün.
Hücreleri ayırmak için santrifüjleyin. Sindirim karışımını içeren süpernatanı atın. Hücre peletini taze ortamda yeniden süspanse edin. Son olarak, bu hücre süspansiyonunun istenen hacmini steril bi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin