JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 2:42 dk. • April 30th, 2023
RNA hibridizasyonu sırasında kromojenik sinyalleri tespit etmek için, bir cam slayt üzerinde bir doku kesiti alarak başlayın. Bu bölüm, yaban turpu peroksidaz işaretli RNA probu ile önceden hibritlenmiş hedef RNA'yı içerir.
Doku bölümünün üzerine birkaç damla diaminobenzidin veya bir tespit substratı olan DAB damlatın ve inkübe edin.
DAB hücreye girer ve yaban turpu peroksidaz enzimi onu kahverengi bir çökelti oluşturmak üzere oksitler. Bu reaksiyon, hücredeki belirli RNA dizilerine kahverengi bir renk verir. Hedef RNA içermeyen hücreler peroksidaz aktivitesine sahip olmayacak ve boyanmadan kalacaktır.
Ardından, doku bölümünü hematoksilen ile boyayın. Hematoksilen DNA'ya bağlanır ve doku bölümüne mor bir leke verir.
Doku bölümüne amonyak suyu uygulayın - mavilik bir çözelti. Mor lekenin yoğunluğunu azaltarak hücrelerin mavi görünmesini sağlar. Bu adım, hücrelerin içindeki kahverengi lekelerin net bir şekilde görselleştirilmesi için gereklidir.
Şimdi, doku bölümünü artan etanol konsantrasyonlarına daldırın ve ardından organik bir çözücü olan ksilen ile muamele edin. Bu adımlar, daha iyi görüntüler elde etmek için doku bölümünü kurutur.
Son olarak, sürgüyü bir montaj solüsyonu ve bir
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin