JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 5:22 dk. • April 30th, 2023
Bir tümör, yan popülasyon olarak bilinen kök benzeri hücrelerin küçük bir kısmını içerir. Bu hücreler kemorezenttir, bu da onları kanserin nüksetmesinden sorumlu kılar.
Kanser hücrelerinin yan popülasyonunu izole etmek için, kanser hücresi süspansiyonu içeren şişeye bir floresan boya çözeltisi olan Hoechst ekleyerek başlayın. Normal kanser hücrelerinin içinde, Hoechst molekülleri çekirdeğe girer ve DNA'daki AT açısından zengin bölgeye bağlanır ve bu hücrelerde yüksek floresansa yol açar.
Buna karşılık, yan popülasyon yüksek konsantrasyonda ABC taşıyıcıları içerir - boya moleküllerini hücreden hızla uzaklaştıran akış pompaları. Boya moleküllerinin bu aktif akışı, yan popülasyonun düşük yoğunlukta floresan olmasını sağlar.
Şimdi, Hoechst ile tedavi edilen kanser hücrelerinin başka bir şişesini alın ve buna Verapamil ekleyin. Bu şişe, Verapamil ABC taşıyıcılarını bloke ettiği için bir kontrol görevi görür. Bu adım, Hoechst akışında bir azalmaya neden olur ve boyayı yan popülasyon hücrelerinin içinde tutar.
Daha sonra, propidyum iyodür kullanarak her iki şişedeki hücreleri karşı boyayın. Propidyum iyodür sadece ölü hücrelerin çekirdeğine girer ve DNA bazları arasında ara araya girer. B
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin