JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:08 dk. • April 30th, 2023
Omurilik ekstraksiyonu için, yüzüstü pozisyonda ötenazi yapılmış bir fare ile başlayın. Kürkten kaynaklanan herhangi bir olası kontaminasyonu önlemek için etanol püskürtün.
Orta hattı baştan kuyruğa kadar kesin ve alttaki dokuyu ortaya çıkarmak için cildi açın. Kafatasını servikal omurgaya bağlayan kraniyoservikal kavşağı bulmak için farenin kafatasını inceleyin.
Ardından, baş ve boyun arasındaki bağlantıyı kesmek için kraniyoservikal kavşağı dik olarak kesin. Omurgayı beşinci bel omuruna kadar inceleyin. Daha sonra, alt vertebral seviyelerden bağlantıyı kesmek için omurgayı beşinci bel omurundan kesin.
Şimdi, fareyi sırtüstü pozisyona çevirin. Hem karın hem de göğüs boşluğunu ortaya çıkarmak için peritonu ve göğüs duvarını kesin. Vertebra kolonuna erişmek için peritoneal ve retroperitoneal organları çıkarın.
Vertebra kolonu vücudun geri kalanından ayırmak için kaburgaları kesin. Son olarak, kan kirleticilerini temizlemek için izole edilmiş omuriliği soğuk tuzlu su çözeltisiyle durulayın.
Hayvanı bir CO2 odasında ötenazi yaptıktan sonra, kürkü% 70 etanol ile ıslatın ve kurumasını bekleyin. Fareyi yüzüstü pozisyonda sabitleyin ve ardından arka boyundan bel omurgasına kraniyokaudal olarak uzanan bir orta hat kesisi yapın.
Daha sonra, dermal flepleri bilateral olarak kaldırmak ve deri altı dokusunu ortaya çıkarmak için forseps kullanın. Kraniyoservikal bağlantı tanımlanana kadar fare kafatasını palpe edin. Kraniyoservikal kavşakta servikal kasları ve omurgayı kesmek için hayvana dik açılı makas kullanın. Ardından, omurgayı kaudal olarak inceleyin ve beşinci bel omurunda tam bir kaudal transeksiyon yapmak için makas kullanın.
Ardından, fareyi sırtüstü pozisyonda konumlandırın ve boyundan karın bölgesine kadar orta hat boyunca bir kesi yaptıktan sonra cildi yanal olarak geri çekin ve ardından peritonu kesin.
Kraniyel olarak, göğüs duvarını makasla açın. Peritoneal ve retroperitoneal organları çıkardıktan sonra, kaburgaları kesmek için forseps ve cerrahi bir bıçak kullanın ve vertebral kolondan çıkıntı yapan yaklaşık 5 milimetre kaburga bırakın. Vertebra kolonu vücudun geri kalanından çıkarın ve soğuk PBS ile iki kez yıkayın.