Metil tiyazolil tetrazolyum veya MTT testi: kanser hücrelerinde metabolik aktivitenin belirlenmesi yoluyla ilaç direncini ölçmek için kolorimetrik bir test

Metil tiyazol, tetrazolyum veya MTT testi, hücresel metabolik aktivitenin ölçümüne dayalı hücre canlılığı değerlendirmesine izin verir.

Tahlillere başlamak için, ilgilenilen ilacın bir dizi artan konsantrasyonunu hazırlayın. Çok kuyulu bir plakanın kuyucuklarına eşit hacimlerde farklı ilaç konsantrasyonları ekleyin.

Daha sonra, istenen ilaca duyarlı ebeveyn kanser hücrelerinin bir süspansiyonunu ve ilaca dirençli varyantlarını uygun bir ortamda, her biri farklı ilaç konsantrasyonları içeren bir dizi oyuğa pipetleyin. Plakayı inkübe edin.

Kültürde, ilaca duyarlı kanser hücreleri ilaç moleküllerine duyarlıdır ve düşük konsantrasyonlarda bile hücre ölümüne yol açar. Aksine, ilaca dirençli kanser hücreleri ilaç moleküllerine karşı duyarsızdır ve daha yüksek ilaç konsantrasyonlarında bile hayatta kalmalarını ve çoğalmalarını kolaylaştırır.

Hücreleri MTT çözeltisi ile tedavi edin ve inkübe edin. Pozitif yüklü bir tetrazolyum tuzu olan MTT, metabolik olarak aktif hücrelere kolayca nüfuz eder. Bu hücreler içinde, NAD (P) H'ye bağımlı oksidoredüktaz enzimleri, MTT tuzunu suda çözünmeyen formazan kristallerine indirger ve bu kristaller hücre yüzeyine taşınır.

Şimdi, kuyucuklara uygun bir çöz