JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 4:41 dk. • April 30th, 2023
Tükürükler in vitro, tükürük bezinden türetilen epitel hücrelerinin kendi kendine toplanan kültürleridir. Tükürük kültürlerine başlamak için, insan tükürük bezi dokusunu bir kültür plakasına alarak başlayın.
Makas kullanarak dokuyu ince parçalar halinde kıyın. Daha sonra, bu parçaları kollajenaz ve dispase enzimleri içeren bir ayrışma solüsyonu ile destekleyin ve inkübe edin. Bu enzimler dokuda bulunan hücre dışı matrisi sindirir.
Ayrıca, dokuyu homojenize etmek için ezin. Bu adım, epitel hücrelerini ve eritrositleri çözeltiye bırakır. Ardından, bir hücre süzgeci kullanın ve sindirilmemiş doku parçalarını ve kalıntıları gidermek için doku homojenatını yeni bir konik tüpe süzün. Hücreleri peletlemek için santrifüjleyin.
Santrifüjlemeyi takiben, süpernatanı atın ve hücre peletini RBC lizis tamponunda yeniden süspanse edin. Bu tampon, hücre süspansiyonunda bulunan eritrositleri parçalar.
Şimdi, epitel hücrelerini peletlemek için santrifüjleyin. Peletleri uygun bir epitel hücresi büyüme ortamına yeniden süspanse edin. Ek olarak, tükürük kültür plakasını kuyusunu sıvılaştırılmış bir bazal membran matrisi veya BMM ile kaplayarak hazırlayın. Matrisin katılaşmasına izin vermek için inkübe
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin