İndüklenmiş Pluripotent Kök Hücrelerden İnsan Böbrek Podositlerinin Türetilmesi: Olgun Böbrek Podositlerinin Kök Hücrelerden Yönlendirilmiş Farklılaşması İçin Bir Prosedür

Olgun hücreler, kök hücre benzeri farklılaşmamış ve proliferatif durumlarını yeniden kazanmak için yeniden programlanabilir. Bu yeniden programlanmış hücrelere indüklenmiş pluripotent kök hücreler veya IPSC'ler denir. Pluripotent hücreleri, atıkların böbreklerden süzülmesinde yer alan podositlere özel hücrelere ayırmak için, bir mezoderm indüksiyon ortamında insan IPSC'lerinin bir süspansiyonunu alarak başlayın.

Bu süspansiyonu bodrum matrisi kaplı bir kültür plakasına aktarın ve inkübe edin. Bodrum matrisi, IPSC'lerin tabana yapışmasını kolaylaştırır. Daha sonra, ortamda bulunan spesifik faktörler, IPSC'lerin podositler için öncü hücreler olan mezoderm hücrelerine farklılaşmasını indükler. Harcanan medyayı aspire edin.

Plakayı istenen hacimde bir ara mezoderm indüksiyon ortamı ile destekleyin ve uzun süre inkübe edin. Bu adım, mezodermal hücrelerin olgunlaşmamış podositlere farklılaşmasına yol açar. Yapışık hücreleri plakadan ayırmak için ara mezoderm indüksiyon ortamını bir tripsin çözeltisi ile değiştirin.

Sonraki, hücreleri peletlemek için santrifüjleyin. Tripsin çözeltisi ve matris parçaları içeren süpernatanı atın. Peleti bir podosit indüksiyon ortamında yeniden süspanse edin