Ortotopik Mesane Tümörünün Fare Modelinde Modellenmesi: Kanser Hücrelerinin Murin Mesanesine İntravezikal Uygulanması İçin Bir Prosedür

İntravezikal damlatma, bir alıcı hayvanın idrar kesesine kanser hücresi verilmesini kolaylaştırır. Başlamak için, vücut ısısını düzenlemek için anestezi uygulanmış bir dişi fareyi bir ısıtma yastığı üzerinde sırtüstü pozisyonda hazırlayın. İdrar kesesini boşaltın.

Daha sonra, poli-L-lizin veya PLL çözeltisi içeren bir şırıngaya bağlı bir kateter monte edin. Düzgün üretral yerleştirme sağlamak ve mesaneye erişim sağlamak için kateter ucunu yağlayın. Yerleştirmeden sonra, PLL solüsyonunu mesaneye yavaşça enjekte edin.

PLL'nin yavaş verilmesi vezikoüreteral reflüyü önler - idrarın mesaneden üreterlere ve böbreklere geri akışı. Erken çıkışı önlemek için kateter üzerine bir durdurucu yerleştirin. Enjekte edilen pozitif yüklü PLL molekülleri, mesanenin iç duvarındaki negatif yüklü glikozaminoglikan kaplamaya etkileşime girer ve yapışır.

Kateteri çıkarın ve bağlanmamış PLL çözeltisinin ve idrarın mesanesini boşaltın. Başka bir kateter-şırınga düzeneği kullanarak, vezikoüreteral reflüyü ve böbreklerde müteakip hücre implantasyonunu önlemek için mesaneye soğutulmuş bir kanser hücresi süspansiyonu yavaşça enjekte edin. Durdurucuyu kateter üzerine sabitleyin.

Glikozaminoglikan tabakasının değişen yüzey yükü, kanser hücreleri ile elektrostatik etkileşimini artırarak yapışmalarını kolaylaştırır. Kateteri çıkarın ve yapışmamış kanser hücrelerinin ve idrarın mesanesini boşaltın. Zamanla, mesane içine implante edilen kanser hücreleri, birincil tümörler oluşturmak için çoğalır.

Bir dişi fare anestezi uygulandıktan sonra, 10 gram vücut ağırlığı başına 0.1 mililitrede Hartmann çözeltisinin intraperitoneal enjeksiyonu ile hidrasyon sağlayın. Anestezi sırasında bunu her bir veya iki saatte bir tekrarlayın.

Ardından, her iki göze de steril oftalmik merhem sürün. Gerektiği gibi yeniden uygulayın. Ardından, vücut ısısını korumak için fareyi bir ısı yastığı üzerindeki kağıt havluların üzerine sırtüstü yatırın. Ardından, arka ayakları bantla sabitleyin. Şimdi, alt karın bölgesine hafif bir baskı uygulayın ve idrarı 1,5 mililitrelik bir tüpe toplayın.

Daha sonra, steril PLL ile 1 mililitrelik bir şırınga yükleyin ve iğne stilesi çıkarılmış olarak 24 gauge IV kateter takın. Kateterin ucuna kayganlaştırıcı sürün. Daha sonra kateteri üretraya yerleştirin ve forseps kullanarak mesaneye yönlendirin. Direnç hissedildiğinde durun. Ardından, vezikoüreteral reflüyü önlemek için her 20 saniyede bir 10 mikrolitre oranında 50 mikrolitre PLL'yi yavaşça çıkarın.

Şimdi, dışarı akışı önlemek için kateteri bir tıpa ile 20 dakika mesanede bırakın. 20 dakika sonra, kateteri çıkarın ve alt karın bölgesine hafifçe bastırarak mesaneyi herhangi bir içerikten boşaltın. Ardından, 1 mililitrelik bir şırınga kullanarak, kalan içeriği kateterden boşaltın.

Şimdi, MB49-PSA hücrelerini pipetleyerek iyice karıştırın ve 1 mililitrelik bir şırıngaya yükleyin. Kateteri takın ve daha önce olduğu gibi yağlayın. Kateteri daha önce olduğu gibi mesaneye yerleştirin ve 20 saniyede 10 mikrolitrelik kademeli bir ejeksiyon kullanarak hücreleri enjekte etmeye başlayın. Ardından bir saat bekleyin.

Bir saat sonra, kateteri çıkarın ve mesaneyi herhangi bir içerikten boşaltın. Ardından fareyi bırakın. Ventral tarafına yerleştirin ve bir atipamezol enjeksiyonu ile canlandırın. Şimdi, fareyi sternal yaslanma halini geri kazanana kadar izleyin ve ardından ev kafesine geri koyun.

• Intravesical - Pertains to inside or into the urinary bladder, often referring to medical procedures.
• Anesthetized – The process of administrating anesthesia to a living being.
• Mb49-PSA cells - Mouse bladder cancer cells used for research purposes.
• Hartmann's Solution - A type of intravenous fluid used to replace lost body fluids and electrolytes.
• Atipamezole - A medication used to reverse the effects of anesthesia in animals.

• Explain the intravesical technique – this procedure involves administering substances directly into the bladder (e.g., intravesical).
• Understanding the role of anesthesia – Anesthesia is vital to ensure the comfort and safety of the mouse during invasive procedures (e.g., anesthetized).
• Describing the role of MB49-PSA cells in research – These cells are crucial for understanding bladder related diseases (e.g., Mb49-PSA cells).
• Explaining the purpose of Hartmann's Solution – It provides essential hydration to the subject to prevent dehydration during anesthesia (e.g., Hartmann's Solution).
• Connecting to the use of Atipamezole in the experiment – Atipamezole is important in recovery from anesthesia (e.g., Atipamezole).

• [Question 1] What does intravesical mean and how is it used in the experiment?
• [Question 2] How does anesthesia aid in this experiment and procedures?
• [Question 3] What is the role of MB49-PSA cells in this procedure?

• Discussing the practical utility of intravesical technique – this method elevates the success rate of direct substance delivery in medical procedures (e.g., intravesical).
• Highlighting the importance of anesthetics in the industry – Anesthetics are crucial for invasive procedures in veterinary and human medicine (e.g., anesthetized).
• Emphasizing the importance of MB49-PSA cells in research industry - Such cells enable a deeper understanding of bladder related diseases (e.g., Mb49-PSA cells).
• Mentioning the significance of Hartmann's Solution – It has a wide range of applications in healthcare, providing essential hydration during medical procedures (e.g., Hartmann's Solution).
• Linking the importance of Atipamezole in scientific advancements – Atipamezole's development has been crucial in improving post anesthesia recovery, benefiting both the healthcare and animal care industries (e.g., Atipamezole).