JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:04 dk. • April 30th, 2023
Eksozomlar - nano boyutlu, hücre kaynaklı zar vezikülleri - çift sarmallı küçük enterferans yapan RNA veya siRNA için terapötik dağıtım araçları olarak potansiyel sergiler.
Hedef hücrenin sitoplazmasına salındıktan sonra siRNA, RNA'nın neden olduğu susturma kompleksine bağlanır. Aktive edilmiş kompleks daha sonra spesifik mRNA'yı tanır ve ona bağlanır, ekspresyonunu negatif olarak düzenler ve gen susturulmasına aracılık eder.
siRNA'yı eksozomlara kapsüllemek için önce bir elektroporasyon küvetini buz üzerinde soğutun. Daha sonra, eksozomları ve spesifik siRNA'yı uygun bir elektroporasyon tamponu kullanarak istenen oranda bir tüpte karıştırın. Şimdi bu karışımı önceden soğutulmuş küvete aktarın.
Küveti kapatın ve elektroporatörün küvet tutucusuna yerleştirin. Küvetin elektroporasyon elektrotlarıyla temas ettiğinden emin olmak için dönen tekerleği döndürün. Şimdi, seçilen elektroporasyon programını çalıştırın.
Elektroporasyon sırasında, elektrik darbeleri, iletken tamponda asılı kalan eksozomların fosfolipid çift tabakasını bozar. Bu, eksozom zarında geçici gözeneklerin oluşumuyla sonuçlanır ve siRNA'nın veziküle difüzyonunu teşvik eder. Tampon, siRNA agregasyonunu önlemeye yardımcı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin