Periyodik Asit Schiff veya PAS Boyama: Glomerulusun Yapısal Deformitelerini Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

Glomerulus, böbrek içindeki atıkları filtreleyen ve kandaki fazla sıvıyı uzaklaştıran karmaşık bir kılcal damar ağıdır. Böbrek filtrasyon hızı, Periyodik Asit Schiff veya PAS boyası kullanılarak incelenebilen bu özel yapıya bağlıdır.

Başlamak için, bir cam slayt üzerinde parafinli bir böbrek korteksi bölümü alın. Slayta ksilen ile muamele edin. Ksilen molekülleri, parafin mumunu doku bölümünden çözer. Daha sonra, numuneyi azalan alkol konsantrasyonlarına maruz bırakın. Alkol, lekenin daha sonra bağlanması için doku bölümünü yeniden sulandırırken ksilen izlerini giderir.

Şimdi, numuneye periyodik asit ekleyin. Periyodik asit, glikojen veya müsin gibi doku polisakkaritlerinde bulunan diolleri aldehitlere dönüştürür. Bu aldehitler, bir fuksin-sülfürik asit kombinasyonu olan Schiff reaktifi ile reaksiyona girerek doku bölümünü lekeleyen macenta renkli bir boya oluşturur. Fazla lekeyi çıkarmak için slaytı durulayın.

Durulamadan sonra, DNA'ya bağlanan ve onu mora boyayan nükleer bir karşı leke olan demir-hematoksilen ekleyin. Fazla lekeyi çıkarmak için yıkayın. Son olarak, numuneyi artan alkol güçleri ve ardından bir temizleme maddesi olarak işlev gören ksilen ile kurutun. Bu adım, mikroskobik inceleme için doku bölümünün kontrastını iyileştirmeye yardımcı olur.

Glomerüler hastalık, bazal zarın kalınlaşması, değişmiş kılcal damarlar ve bozulmuş böbrek fonksiyonu ile ilgili anormal hücreler olarak görselleştirilebilir.

Glomerüler hücrelerin ve mezanjiyal matrisin ayrıntılı görselleştirilmesi için, sabit parafine gömülü böbrek korteks örneklerini 1 saat boyunca 37 santigrat derecede kurutun, ardından ardışık ksilen ve azalan etanol daldırmaları ile deparafinizasyon yapın. Numuneleri damıtılmış suda 5 dakika rehidre edin ve slaytları bir duman kabininde Periyodik Asit çözeltisi içinde inkübe edin.

5 dakika sonra, slaytları 100 mililitre damıtılmış suda 5 dakikalık üç yıkama ile durulayın, ardından Schiff reaktifinde 15 dakikalık bir inkübasyon yapın. İnkübasyonun sonunda, slaytları 5 dakika boyunca akan musluk suyunda yıkayın ve akan musluk suyunda 15 dakika daha iyice durulamadan önce 3 saniye boyunca hematoksilen ile lekeleyin.

Ardından, slaytları artan etanol daldırmaları ve iki ardışık 3 dakikalık ksilen daldırması ile kurutun. Havayla kurutulduktan sonra, slaytlar, glomerüler yapılarının 400X büyütmede bir ışık mikroskobu üzerinde değerlendirilmesi için ksilen bazlı montaj ortamı ile monte edilebilir.

• Periodic Acid Schiff Stain - Method used to visualize glomerular cells and the mesangial matrix.
• PAS Stain Glomerulus - Specific application of PAS stain in kidney cortex study.
• Acid Schiff Staining - Another name for the PAS staining process.
• Periodic Acid Structure - Part of PAS stain, involved in revealing cellular structure in staining.
• Glomerular Tuft - Structure in kidney cortex, analyzed using PAS stain.

• Periodic Acid Schiff Stain - Define and contextualize (e.g., periodic acid schiff stain).
• Key Concepts - Summarize principles (e.g., staining theory).
• Underlying Mechanisms - Short description of PAS staining process.
• Connect to Experiment - Brief rationale linking periodic acid and schiff reagent to kidney cortex sample study.

• What is the Periodic Acid Schiff Stain method and how it contributes to kidney cortex research?
• How does the PAS staining process work?
• What is the role of the Glomerular Tuft in PAS staining?

• Describe Practical Applications - PAS stain used for analyzing kidney structures (e.g., medical diagnosis).
• Industry Impact - Benefits healthcare, particularly nephrology.
• Societal Importance - Enables better understanding of kidney diseases (e.g., education).
• Link to Scientific Advancements - Short description of innovations in staining techniques.